生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2010年
2期
171-174
,共4页
马威%沈志娜%陈轶群%李志民%曹云鹤
馬威%瀋誌娜%陳軼群%李誌民%曹雲鶴
마위%침지나%진질군%리지민%조운학
β-甘露聚糖酶%枯草芽孢杆菌%毕赤酵母%分泌表达
β-甘露聚糖酶%枯草芽孢桿菌%畢赤酵母%分泌錶達
β-감로취당매%고초아포간균%필적효모%분비표체
目的:研制高效分泌表达枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的毕赤酵母基因工程菌株.方法与结果:将优化设计的枯草芽孢杆菌MA139 β-甘露聚糖酶基因用EcoR Ⅰ/XbαⅠ双酶切,克隆到诱导型表达载体pPICzαA中α因子信号肽编码序列的下游,转化大肠杆菌筛选重组质粒,转化毕赤酵母X-33感受态细胞,经Zeocin筛选,获得重组表达菌株X-33/mann.将重组菌株在10 L全自动发酵罐中进行高密度发酵培养,甲醇诱导72 h发酵活力达到2100 U/mL.重组甘露聚糖酶的最适催化温度为40℃,最适催化pH值为6.0.结论:枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中获得了高效分泌表达,具有开发作为饲料添加剂的潜能.
目的:研製高效分泌錶達枯草芽孢桿菌β-甘露聚糖酶的畢赤酵母基因工程菌株.方法與結果:將優化設計的枯草芽孢桿菌MA139 β-甘露聚糖酶基因用EcoR Ⅰ/XbαⅠ雙酶切,剋隆到誘導型錶達載體pPICzαA中α因子信號肽編碼序列的下遊,轉化大腸桿菌篩選重組質粒,轉化畢赤酵母X-33感受態細胞,經Zeocin篩選,穫得重組錶達菌株X-33/mann.將重組菌株在10 L全自動髮酵罐中進行高密度髮酵培養,甲醇誘導72 h髮酵活力達到2100 U/mL.重組甘露聚糖酶的最適催化溫度為40℃,最適催化pH值為6.0.結論:枯草芽孢桿菌β-甘露聚糖酶在畢赤酵母中穫得瞭高效分泌錶達,具有開髮作為飼料添加劑的潛能.
목적:연제고효분비표체고초아포간균β-감로취당매적필적효모기인공정균주.방법여결과:장우화설계적고초아포간균MA139 β-감로취당매기인용EcoR Ⅰ/XbαⅠ쌍매절,극륭도유도형표체재체pPICzαA중α인자신호태편마서렬적하유,전화대장간균사선중조질립,전화필적효모X-33감수태세포,경Zeocin사선,획득중조표체균주X-33/mann.장중조균주재10 L전자동발효관중진행고밀도발효배양,갑순유도72 h발효활력체도2100 U/mL.중조감로취당매적최괄최화온도위40℃,최괄최화pH치위6.0.결론:고초아포간균β-감로취당매재필적효모중획득료고효분비표체,구유개발작위사료첨가제적잠능.
