生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2010年
5期
686-690
,共5页
杜昕颖%孙宏迪%王玉飞%陈泽良%张伶%宋宏彬%孙岩松%黄留玉
杜昕穎%孫宏迪%王玉飛%陳澤良%張伶%宋宏彬%孫巖鬆%黃留玉
두흔영%손굉적%왕옥비%진택량%장령%송굉빈%손암송%황류옥
O1群霍乱弧菌%荧光定量PCR%rfb基因
O1群霍亂弧菌%熒光定量PCR%rfb基因
O1군곽란호균%형광정량PCR%rfb기인
目的:建立针对O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法,并进行模拟粪便标本的检测评价.方法:根据O1群霍乱弧菌O抗原编码基因rfb的特异性序列设计引物和TaqMan探针,建立检测O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法,对所建立的方法分别进行实验室内的灵敏度及特异性评价;将O1群霍乱弧菌灭活菌株悬液倍比稀释后与健康成人新鲜粪便混匀,制备成模拟带菌者粪便标本,提取DNA,进行Taq-Man PCR检测,用以评价该方法.结果:建立了快速检测O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR方法,灵敏度为每反应体系104拷贝;该方法对其他14种肠道菌DNA没有扩增;该方法对模拟粪便标本的检测灵敏度为每反应体系102 CFU.结论:建立了一种快速、高效检测O1群霍乱弧菌的荧光定量PCR检测方法,该方法可用于O1群霍乱弧菌临床粪便标本的检测.
目的:建立針對O1群霍亂弧菌的實時熒光定量TaqMan PCR快速檢測方法,併進行模擬糞便標本的檢測評價.方法:根據O1群霍亂弧菌O抗原編碼基因rfb的特異性序列設計引物和TaqMan探針,建立檢測O1群霍亂弧菌的實時熒光定量TaqMan PCR快速檢測方法,對所建立的方法分彆進行實驗室內的靈敏度及特異性評價;將O1群霍亂弧菌滅活菌株懸液倍比稀釋後與健康成人新鮮糞便混勻,製備成模擬帶菌者糞便標本,提取DNA,進行Taq-Man PCR檢測,用以評價該方法.結果:建立瞭快速檢測O1群霍亂弧菌的實時熒光定量TaqMan PCR方法,靈敏度為每反應體繫104拷貝;該方法對其他14種腸道菌DNA沒有擴增;該方法對模擬糞便標本的檢測靈敏度為每反應體繫102 CFU.結論:建立瞭一種快速、高效檢測O1群霍亂弧菌的熒光定量PCR檢測方法,該方法可用于O1群霍亂弧菌臨床糞便標本的檢測.
목적:건립침대O1군곽란호균적실시형광정량TaqMan PCR쾌속검측방법,병진행모의분편표본적검측평개.방법:근거O1군곽란호균O항원편마기인rfb적특이성서렬설계인물화TaqMan탐침,건립검측O1군곽란호균적실시형광정량TaqMan PCR쾌속검측방법,대소건립적방법분별진행실험실내적령민도급특이성평개;장O1군곽란호균멸활균주현액배비희석후여건강성인신선분편혼균,제비성모의대균자분편표본,제취DNA,진행Taq-Man PCR검측,용이평개해방법.결과:건립료쾌속검측O1군곽란호균적실시형광정량TaqMan PCR방법,령민도위매반응체계104고패;해방법대기타14충장도균DNA몰유확증;해방법대모의분편표본적검측령민도위매반응체계102 CFU.결론:건립료일충쾌속、고효검측O1군곽란호균적형광정량PCR검측방법,해방법가용우O1군곽란호균림상분편표본적검측.
