内皮祖细胞作为干扰素基因载体的体外抑瘤实验
내피조세포작위간우소기인재체적체외억류실험
Endothelial progenitor cells delivering the genes of interferon inhibit the growth of cancer cells in vitro
  • 万方数据
    临床肿瘤学杂志 림상종류학잡지
    CHINESE CLINICAL ONCOLOGY
    2012年 8期 682-685 ,共4页

    王鈜%王春平%毕京峰%高旭东%陆荫英%曲建慧%白文林%许桂林%曾珍%楼敏%杨永平

    왕횡%왕춘평%필경봉%고욱동%륙음영%곡건혜%백문림%허계림%증진%루민%양영평

    内皮祖细胞%干扰素%肿瘤%腺病毒 內皮祖細胞%榦擾素%腫瘤%腺病毒
    내피조세포%간우소%종류%선병독
    目的 研究用人骨髓诱导培养内皮祖细胞(EPCs)并以其作为免疫性基因载体治疗肿瘤的可行性.方法 采用梯度离心法从人骨髓中分离单个核细胞,加入人血管内皮生长因子(VEGF165)诱导培养,用流式细胞仪测定细胞表面标志CD133、KDR和CD34的表达情况.以增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为报告基因,用流式细胞仪检测携带EGFP基因的腺病毒载体(Ad-EGFP)对EPCs的感染效率.携带人干扰素γ(hγIFN)基因的腺病毒载体(Ad-hγIFN)感染EPCs(EPCshγIFN),ELISA法检测细胞EPCs-hγIFN分泌hγIFN的情况.将EPCs-hγIFN与肺癌细胞株H460、胃癌细胞株SGC7901、大肠癌细胞株LoVo混合培养,观察EPCs-hγIFN对肿瘤细胞的作用.结果 经过诱导培养2周后,贴壁的单核细胞开始表达CD133、KDR和CD34.Ad-EGFP的感染复数(MOI)为150pfu/EPCs时,感染率达90％以上.EPCs-hγIFN培养上清可以测得浓度稳定且高水平的hγIFN,第1天上清液中的hγIFN浓度为1305.28pg/ml,第14天为1419.10pg/ml.EPCs-hγIFN与H460、5GC7901、LoVo细胞株混合培养4天,肿瘤细胞的生长受到明显的抑制,肿瘤细胞存活率分别为(77.87±6.50)％、(79.36±4.35)％和(69.52±3.78)％,均显著低于对照组(P＜0.05).结论 携带hγIFN目的基因的腺病毒转染EPCs后基因表达情况良好,体外实验中表现为抑制肿瘤细胞的生长,可作为免疫性基因载体开展进一步的研究.
    목적 연구용인골수유도배양내피조세포(EPCs)병이기작위면역성기인재체치료종류적가행성.방법 채용제도리심법종인골수중분리단개핵세포,가입인혈관내피생장인자(VEGF165)유도배양,용류식세포의측정세포표면표지CD133、KDR화CD34적표체정황.이증강형록색형광단백기인(EGFP)작위보고기인,용류식세포의검측휴대EGFP기인적선병독재체(Ad-EGFP)대EPCs적감염효솔.휴대인간우소γ(hγIFN)기인적선병독재체(Ad-hγIFN)감염EPCs(EPCshγIFN),ELISA법검측세포EPCs-hγIFN분비hγIFN적정황.장EPCs-hγIFN여폐암세포주H460、위암세포주SGC7901、대장암세포주LoVo혼합배양,관찰EPCs-hγIFN대종류세포적작용.결과 경과유도배양2주후,첩벽적단핵세포개시표체CD133、KDR화CD34.Ad-EGFP적감염복수(MOI)위150pfu/EPCs시,감염솔체90％이상.EPCs-hγIFN배양상청가이측득농도은정차고수평적hγIFN,제1천상청액중적hγIFN농도위1305.28pg/ml,제14천위1419.10pg/ml.EPCs-hγIFN여H460、5GC7901、LoVo세포주혼합배양4천,종류세포적생장수도명현적억제,종류세포존활솔분별위(77.87±6.50)％、(79.36±4.35)％화(69.52±3.78)％,균현저저우대조조(P＜0.05).결론 휴대hγIFN목적기인적선병독전염EPCs후기인표체정황량호,체외실험중표현위억제종류세포적생장,가작위면역성기인재체개전진일보적연구.
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