中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
21期
164-168
,共5页
张秀春%李若霖%唐文%夏亦荠%彭明%吴坤鑫
張秀春%李若霖%唐文%夏亦薺%彭明%吳坤鑫
장수춘%리약림%당문%하역제%팽명%오곤흠
启动子%AtNUDT10%克隆%GUS染色
啟動子%AtNUDT10%剋隆%GUS染色
계동자%AtNUDT10%극륭%GUS염색
根据已发表的拟南芥基因组序列设计合成一对引物,以拟南芥基因组DNA为模板克隆AtNUDT10上游非编码区,并与pBAR-GUS3相连构建了植物表达载体pNUDT10P-GUS,采用农杆菌GV3101介导的渗透法转化野生型拟南芥,通过除草剂筛选获得了一批抗性纯合子转基因植株.然后对转基因植株2周幼苗进行GUS活性的组织化学染色分析,并对3.5~4周的转基因植株叶片进行病原菌诱导表达分析.结果表明,已获得AtNUDT10启动子,该启动子为组成型表达的启动子,并且病原菌Pst.DC3000及Pst.DC3000 AvrB对该启动子没有诱导作用.
根據已髮錶的擬南芥基因組序列設計閤成一對引物,以擬南芥基因組DNA為模闆剋隆AtNUDT10上遊非編碼區,併與pBAR-GUS3相連構建瞭植物錶達載體pNUDT10P-GUS,採用農桿菌GV3101介導的滲透法轉化野生型擬南芥,通過除草劑篩選穫得瞭一批抗性純閤子轉基因植株.然後對轉基因植株2週幼苗進行GUS活性的組織化學染色分析,併對3.5~4週的轉基因植株葉片進行病原菌誘導錶達分析.結果錶明,已穫得AtNUDT10啟動子,該啟動子為組成型錶達的啟動子,併且病原菌Pst.DC3000及Pst.DC3000 AvrB對該啟動子沒有誘導作用.
근거이발표적의남개기인조서렬설계합성일대인물,이의남개기인조DNA위모판극륭AtNUDT10상유비편마구,병여pBAR-GUS3상련구건료식물표체재체pNUDT10P-GUS,채용농간균GV3101개도적삼투법전화야생형의남개,통과제초제사선획득료일비항성순합자전기인식주.연후대전기인식주2주유묘진행GUS활성적조직화학염색분석,병대3.5~4주적전기인식주협편진행병원균유도표체분석.결과표명,이획득AtNUDT10계동자,해계동자위조성형표체적계동자,병차병원균Pst.DC3000급Pst.DC3000 AvrB대해계동자몰유유도작용.