中华外科杂志
中華外科雜誌
중화외과잡지
CHINESE JOURNAL OF SURGERY
2005年
15期
998-1001
,共4页
路平%鲁阳%庞葵%王舒宝%陈峻青%徐惠绵%王俊科%赵实诚
路平%魯暘%龐葵%王舒寶%陳峻青%徐惠綿%王俊科%趙實誠
로평%로양%방규%왕서보%진준청%서혜면%왕준과%조실성
基因疗法%四氢叶酸脱氢酶%胞苷脱氨酶%甲氨蝶呤%阿糖胞苷
基因療法%四氫葉痠脫氫酶%胞苷脫氨酶%甲氨蝶呤%阿糖胞苷
기인요법%사경협산탈경매%포감탈안매%갑안접령%아당포감
目的探讨同时导入人双突变的二氢叶酸还原酶基因(DHFR)和胞苷脱氨基酶基因(CD)小鼠骨髓细胞对大剂量甲氨蝶呤(MTX)和阿糖胞苷(Ara-C)的耐受性及骨髓耐受联合化疗的可行性.方法以反转录病毒为载体,将人双突变的DHFR和CD通过共培养转染入两只小鼠骨髓干细胞,观察共培养后的骨髓细胞经Ara-C、MTX、Ara-C+MTX处理后,耐MTX及Ara-C粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)生成情况;转基因小鼠骨髓细胞提取的DNA,用聚合酶链反应(PCR)检测转基因小鼠骨髓细胞耐药基因的表达.结果含有耐药基因(SFG-F/S-CD)的骨髓细胞均有耐药克隆的形成,耐Ara-C、MTX、Ara-C + MTX克隆分别为56%、22%和14%,并明显增加了对MTX和Ara-C的耐受(P<0.005);转基因小鼠骨髓细胞经PCR检测,显示有F/S、CD基因表达;耐药基因转染后小鼠骨髓细胞对MTX和Ara-C 的耐受明显增加.结论双耐药基因可以导入小鼠骨髓细胞并且获得表达,提高了造血细胞对MTX和Aar-C的耐药性.
目的探討同時導入人雙突變的二氫葉痠還原酶基因(DHFR)和胞苷脫氨基酶基因(CD)小鼠骨髓細胞對大劑量甲氨蝶呤(MTX)和阿糖胞苷(Ara-C)的耐受性及骨髓耐受聯閤化療的可行性.方法以反轉錄病毒為載體,將人雙突變的DHFR和CD通過共培養轉染入兩隻小鼠骨髓榦細胞,觀察共培養後的骨髓細胞經Ara-C、MTX、Ara-C+MTX處理後,耐MTX及Ara-C粒-巨噬細胞集落形成單位(CFU-GM)生成情況;轉基因小鼠骨髓細胞提取的DNA,用聚閤酶鏈反應(PCR)檢測轉基因小鼠骨髓細胞耐藥基因的錶達.結果含有耐藥基因(SFG-F/S-CD)的骨髓細胞均有耐藥剋隆的形成,耐Ara-C、MTX、Ara-C + MTX剋隆分彆為56%、22%和14%,併明顯增加瞭對MTX和Ara-C的耐受(P<0.005);轉基因小鼠骨髓細胞經PCR檢測,顯示有F/S、CD基因錶達;耐藥基因轉染後小鼠骨髓細胞對MTX和Ara-C 的耐受明顯增加.結論雙耐藥基因可以導入小鼠骨髓細胞併且穫得錶達,提高瞭造血細胞對MTX和Aar-C的耐藥性.
목적탐토동시도입인쌍돌변적이경협산환원매기인(DHFR)화포감탈안기매기인(CD)소서골수세포대대제량갑안접령(MTX)화아당포감(Ara-C)적내수성급골수내수연합화료적가행성.방법이반전록병독위재체,장인쌍돌변적DHFR화CD통과공배양전염입량지소서골수간세포,관찰공배양후적골수세포경Ara-C、MTX、Ara-C+MTX처리후,내MTX급Ara-C립-거서세포집락형성단위(CFU-GM)생성정황;전기인소서골수세포제취적DNA,용취합매련반응(PCR)검측전기인소서골수세포내약기인적표체.결과함유내약기인(SFG-F/S-CD)적골수세포균유내약극륭적형성,내Ara-C、MTX、Ara-C + MTX극륭분별위56%、22%화14%,병명현증가료대MTX화Ara-C적내수(P<0.005);전기인소서골수세포경PCR검측,현시유F/S、CD기인표체;내약기인전염후소서골수세포대MTX화Ara-C 적내수명현증가.결론쌍내약기인가이도입소서골수세포병차획득표체,제고료조혈세포대MTX화Aar-C적내약성.
