CAJ | 학술논문

目的观察扶正化瘀方对内毒素诱导的急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡的影响与部分机制. 方法雄性BABL/c小鼠30只,随机分为3组,正常组10只,模型组10只,治疗组10只.治疗组小鼠给予扶正化瘀方灌胃,每日2次,连续3d,第4日灌胃后1h开始造模;正常组与模型组给予等量生理盐水灌胃.模型组与治疗组小鼠以内毒素10μg/Kg、D-氨基半乳糖900mg/Kg剂量,腹腔注射,诱导急性肝损伤模型;正常组以等剂量生理盐水腹腔注射作为对照.各组小鼠于造模后6h处死,试剂盒法检测血清ALT、AST活性,肝组织TUNEL染色检测肝细胞凋亡,计算凋亡指数;HE染色观察炎症反应与肝细胞坏死;蛋白免疫印迹法分析肝组织细胞凋亡因子bcl-2、bax表达.荧光定量PCR法检测bcl-2和bax的基因表达. 结果与正常小鼠相比,模型组小鼠血清ALT、AS丁活性均明显升高,治疗组小鼠较模型组明显降低.大体病理观察,模型组小鼠肝脏明显肿胀、色泽紫黯、表面见散在点状及片状出血点;治疗组小鼠肝脏胂胀明显减轻、色泽红润、表面未见出血点或少量点状出血点.TUNEL染色显示,正常组小鼠肝组织无或偶见肝细胞凋亡;模型组小鼠肝组织中见大量凋亡肝细胞弥漫性分布于肝小叶各区,肝细胞凋亡指数明显升高;治疗组小鼠肝细胞凋亡指数明显降低.HE染色显示模型组小鼠肝组织小叶结构紊乱,肝窦明显充血,大量炎性细胞浸润,肝细胞灶性坏死;治疗组小鼠肝窦充血、炎性细胞浸润与肝细胞坏死均明显减轻.与正常小鼠比较,模型组小鼠肝组织凋亡调节因子bcl-2基因与蛋白表达明显减少.而bax基因与蛋白表达显著增加;扶正化瘀方能促进bcl-2基因与蛋白表达增加,减少bax基因与蛋白表达. 结论扶正化瘀方可抑制LPS诱导急性肝损伤小鼠的肝细胞凋亡,部分机制与调节凋亡因子bcl-2/bax有关.
목적 관찰부정화어방대내독소유도적급성간손상소서간세포조망적영향여부분궤제. 방법웅성BABL/c소서30지,수궤분위3조,정상조10지,모형조10지,치료조10지.치료조소서급여부정화어방관위,매일2차,련속3d,제4일관위후1h개시조모;정상조여모형조급여등량생리염수관위.모형조여치료조소서이내독소10μg/Kg、D-안기반유당900mg/Kg제량,복강주사,유도급성간손상모형;정상조이등제량생리염수복강주사작위대조.각조소서우조모후6h처사,시제합법검측혈청ALT、AST활성,간조직TUNEL염색검측간세포조망,계산조망지수;HE염색관찰염증반응여간세포배사;단백면역인적법분석간조직세포조망인자bcl-2、bax표체.형광정량PCR법검측bcl-2화bax적기인표체. 결과여정상소서상비,모형조소서혈청ALT、AS정활성균명현승고,치료조소서교모형조명현강저.대체병리관찰,모형조소서간장명현종창、색택자암、표면견산재점상급편상출혈점;치료조소서간장신창명현감경、색택홍윤、표면미견출혈점혹소량점상출혈점.TUNEL염색현시,정상조소서간조직무혹우견간세포조망;모형조소서간조직중견대량조망간세포미만성분포우간소협각구,간세포조망지수명현승고;치료조소서간세포조망지수명현강저.HE염색현시모형조소서간조직소협결구문란,간두명현충혈,대량염성세포침윤,간세포조성배사;치료조소서간두충혈、염성세포침윤여간세포배사균명현감경.여정상소서비교,모형조소서간조직조망조절인자bcl-2기인여단백표체명현감소.이bax기인여단백표체현저증가;부정화어방능촉진bcl-2기인여단백표체증가,감소bax기인여단백표체. 결론부정화어방가억제LPS유도급성간손상소서적간세포조망,부분궤제여조절조망인자bcl-2/bax유관.