家蚕脂质运载蛋白基因BmLip32的特征与表达活性分析
가잠지질운재단백기인BmLip32적특정여표체활성분석
Molecular Characteristics and Expression Analysis of Lipocalin Gene BmLip32 in Bombyx mori
  • 万方数据
    蚕业科学 잠업과학
    ACTA SERICOLOGICA SINICA
    2009年 2期 264-272 ,共9页

    牛伟涛%李珊珊%聂作明%陈健%吕正兵%王丹%吴燕%吴怡%高攀%于威%盛清%沈红丹%张耀洲

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    从已构建的家蚕蛹期cDNA文库中筛选得到一条新的cDNA片断,经生物信息学分析发现其编码框具有脂质运载蛋白(lipocalin)保守结构域,命名为BmLip32基因,GenBank登录号为FJ602775.构建融合表达质粒pET-28a-BmLip32后转化大肠杆菌BL21并诱导表达,将纯化的His-BmLip32融合蛋白免疫新西兰大白兔成功制备多克隆抗体,效价大于1:12 800.RT-PCR检测结果表明BmLip32在家蚕蛹期转录水平最高,在5龄幼虫头部中的转录水平明显高于其它组织.Western blotting分析结果显示BmLip32在5龄幼虫头部大量表达.免疫细胞化学实验显示BmLip32蛋白存在于家蚕Bm5细胞的细胞质中.推测BmLip32基因是家蚕神经系统发育相关的重要调控基因.
    종이구건적가잠용기cDNA문고중사선득도일조신적cDNA편단,경생물신식학분석발현기편마광구유지질운재단백(lipocalin)보수결구역,명명위BmLip32기인,GenBank등록호위FJ602775.구건융합표체질립pET-28a-BmLip32후전화대장간균BL21병유도표체,장순화적His-BmLip32융합단백면역신서란대백토성공제비다극륭항체,효개대우1:12 800.RT-PCR검측결과표명BmLip32재가잠용기전록수평최고,재5령유충두부중적전록수평명현고우기타조직.Western blotting분석결과현시BmLip32재5령유충두부대량표체.면역세포화학실험현시BmLip32단백존재우가잠Bm5세포적세포질중.추측BmLip32기인시가잠신경계통발육상관적중요조공기인.
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