CAJ | 학술논문

目的:观察雷公藤甲素对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导足细胞损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法:免疫荧光染色分析足细胞骨架肌动蛋白(F-actin)和细胞间连接蛋白1(ZO-1)表达和分布;流式细胞仪分析荧光探针CM-H2DCFDA标记的细胞内活性氧(ROS);Western blot检测p-38,细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和Cdun氨基端激酶(JNK)丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化水平. 结果:Ang Ⅱ呈剂量依赖性破坏足细胞骨架结构和细胞间连接,表现为F-actin在胞质中的应力纤维解聚,F-actin的边聚.细胞间连接的断裂,细胞皱缩.雷公藤甲素呈剂量依赖性的拈抗Ang Ⅱ诱导的骨架蛋白解聚和细胞间连接分子的重排,10 ng/ml雷公藤甲素的作用最为明显.雷公藤甲素对足细胞Ang Ⅱ的1型受体(ATIR)和2型受体(AT2R)的表达无明显影响.细胞内ROS及其下游的MAPK信号通路研究显示,Ang Ⅱ(10-7 mol/L)诱导足细胞内ROS的明显增加,激活p-38,ERK和JNK三条MAPK信号通路,雷公藤甲素(10 ng/ml)或抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)(10 mmol/L)预处理细胞后,能够有效遏制Ang Ⅱ诱导的细胞内ROS的产生,抑制MAPK信号通路的活化.结论:雷公藤甲素可稳定足细胞的骨架结构和细胞问连接,拮抗Ang Ⅱ对足细胞的损伤.雷公藤甲素的上述作用与细胞内ROS及下游的p-38、ERK MAPK信号通路密切相关.雷公藤甲素干预Ang Ⅱ诱导的足细胞损伤可能部分参与了其对肾小球疾病的疗效.
목적:관찰뢰공등갑소대혈관긴장소Ⅱ(Ang Ⅱ)유도족세포손상적보호작용,병탐토기작용궤제.방법:면역형광염색분석족세포골가기동단백(F-actin)화세포간련접단백1(ZO-1)표체화분포;류식세포의분석형광탐침CM-H2DCFDA표기적세포내활성양(ROS);Western blot검측p-38,세포외신호조절격매1/2(ERK1/2)화Cdun안기단격매(JNK)사렬원활화단백격매(MAPK)린산화수평. 결과:Ang Ⅱ정제량의뢰성파배족세포골가결구화세포간련접,표현위F-actin재포질중적응력섬유해취,F-actin적변취.세포간련접적단렬,세포추축.뢰공등갑소정제량의뢰성적념항Ang Ⅱ유도적골가단백해취화세포간련접분자적중배,10 ng/ml뢰공등갑소적작용최위명현.뢰공등갑소대족세포Ang Ⅱ적1형수체(ATIR)화2형수체(AT2R)적표체무명현영향.세포내ROS급기하유적MAPK신호통로연구현시,Ang Ⅱ(10-7 mol/L)유도족세포내ROS적명현증가,격활p-38,ERK화JNK삼조MAPK신호통로,뢰공등갑소(10 ng/ml)혹항양화제N을선반광안산(NAC)(10 mmol/L)예처리세포후,능구유효알제Ang Ⅱ유도적세포내ROS적산생,억제MAPK신호통로적활화.결론:뢰공등갑소가은정족세포적골가결구화세포문련접,길항Ang Ⅱ대족세포적손상.뢰공등갑소적상술작용여세포내ROS급하유적p-38、ERK MAPK신호통로밀절상관.뢰공등갑소간예Ang Ⅱ유도적족세포손상가능부분삼여료기대신소구질병적료효.