南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2011年
2期
239-243
,共5页
莫冠文%蔡绍曦%赵海金%李文军%佟万成%刘来昱
莫冠文%蔡紹晞%趙海金%李文軍%佟萬成%劉來昱
막관문%채소희%조해금%리문군%동만성%류래욱
甲苯二异氰酸盐%哮喘%活性氧%氧化应激%血清白蛋白%N-乙酰半胱氨酸%人支气管上皮细胞%细胞通透性
甲苯二異氰痠鹽%哮喘%活性氧%氧化應激%血清白蛋白%N-乙酰半胱氨痠%人支氣管上皮細胞%細胞通透性
갑분이이청산염%효천%활성양%양화응격%혈청백단백%N-을선반광안산%인지기관상피세포%세포통투성
目的 探讨甲苯二异氰酸盐(TDI)对正常人支气管上皮细胞(16HBE)活性氧(ROS)生成及通透性的影响.方法 应用改良的Son氏等方法制备TDI-人血清白蛋白(TDI-HSA).四唑盐(MTT)比色法检测不同浓度的TDI-HSA对正常人支气管上皮细胞株16HBE活力的影响.实验分4组:以未加任何处理因素的16HBE为对照组,20、60、100μg/ml的TDI-HSA处理16HBE 24 h,通过2',7'-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)细胞内ROS荧光染色,收集细胞后以流式细胞仪检测荧光强度.选择对ROS水平影响较大的100 μg/ml的TDI-HSA处理16HBE 24 h.流式细胞仪定量检测抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对TDI-HSA诱导ROS生成的影响,荧光显微镜观察照相.采用跨上皮电阻(TEER)法检测上皮单层细胞的通透性.结果 120μg/ml以下浓度的TDI-HSA对细胞活力无显著影响.ROS水平在对照组、20、60和100μg/ml组分别为:65.04±4.56,91.76±4.84,119.96±10.40,203.11±8.21.100μg/ml TDI-HSA组与对照组及20、60 μg/ml组相比,16HBE的ROS水平显著升高(P＜0.05).对照组、100 μg/ml TDI-HSA处理组、50 mmol/LNAC预处理组的细胞内ROS水平分别为:69.02±2.14,246.47±18.55,102.50±4.60;而TEER分别为:280.75±11.93,92.25±11.44,207.25±7.41.NAC可显著降低TDI-HSA诱导的ROS生成(P＜0.05),改善氧化应激对单层细胞通透性的影响(P＜0.05).结论 TDI显著增加HBEROS的产生,其诱导的氧化应激部分参与支气管上皮细胞通透性的增加.这可能是TDI诱发哮喘的发病机制之一.
目的 探討甲苯二異氰痠鹽(TDI)對正常人支氣管上皮細胞(16HBE)活性氧(ROS)生成及通透性的影響.方法 應用改良的Son氏等方法製備TDI-人血清白蛋白(TDI-HSA).四唑鹽(MTT)比色法檢測不同濃度的TDI-HSA對正常人支氣管上皮細胞株16HBE活力的影響.實驗分4組:以未加任何處理因素的16HBE為對照組,20、60、100μg/ml的TDI-HSA處理16HBE 24 h,通過2',7'-二氫二氯熒光黃雙乙痠鈉(DCFH-DA)細胞內ROS熒光染色,收集細胞後以流式細胞儀檢測熒光彊度.選擇對ROS水平影響較大的100 μg/ml的TDI-HSA處理16HBE 24 h.流式細胞儀定量檢測抗氧化劑N-乙酰半胱氨痠(NAC)對TDI-HSA誘導ROS生成的影響,熒光顯微鏡觀察照相.採用跨上皮電阻(TEER)法檢測上皮單層細胞的通透性.結果 120μg/ml以下濃度的TDI-HSA對細胞活力無顯著影響.ROS水平在對照組、20、60和100μg/ml組分彆為:65.04±4.56,91.76±4.84,119.96±10.40,203.11±8.21.100μg/ml TDI-HSA組與對照組及20、60 μg/ml組相比,16HBE的ROS水平顯著升高(P＜0.05).對照組、100 μg/ml TDI-HSA處理組、50 mmol/LNAC預處理組的細胞內ROS水平分彆為:69.02±2.14,246.47±18.55,102.50±4.60;而TEER分彆為:280.75±11.93,92.25±11.44,207.25±7.41.NAC可顯著降低TDI-HSA誘導的ROS生成(P＜0.05),改善氧化應激對單層細胞通透性的影響(P＜0.05).結論 TDI顯著增加HBEROS的產生,其誘導的氧化應激部分參與支氣管上皮細胞通透性的增加.這可能是TDI誘髮哮喘的髮病機製之一.
목적 탐토갑분이이청산염(TDI)대정상인지기관상피세포(16HBE)활성양(ROS)생성급통투성적영향.방법 응용개량적Son씨등방법제비TDI-인혈청백단백(TDI-HSA).사서염(MTT)비색법검측불동농도적TDI-HSA대정상인지기관상피세포주16HBE활력적영향.실험분4조:이미가임하처리인소적16HBE위대조조,20、60、100μg/ml적TDI-HSA처리16HBE 24 h,통과2',7'-이경이록형광황쌍을산납(DCFH-DA)세포내ROS형광염색,수집세포후이류식세포의검측형광강도.선택대ROS수평영향교대적100 μg/ml적TDI-HSA처리16HBE 24 h.류식세포의정량검측항양화제N-을선반광안산(NAC)대TDI-HSA유도ROS생성적영향,형광현미경관찰조상.채용과상피전조(TEER)법검측상피단층세포적통투성.결과 120μg/ml이하농도적TDI-HSA대세포활력무현저영향.ROS수평재대조조、20、60화100μg/ml조분별위:65.04±4.56,91.76±4.84,119.96±10.40,203.11±8.21.100μg/ml TDI-HSA조여대조조급20、60 μg/ml조상비,16HBE적ROS수평현저승고(P＜0.05).대조조、100 μg/ml TDI-HSA처리조、50 mmol/LNAC예처리조적세포내ROS수평분별위:69.02±2.14,246.47±18.55,102.50±4.60;이TEER분별위:280.75±11.93,92.25±11.44,207.25±7.41.NAC가현저강저TDI-HSA유도적ROS생성(P＜0.05),개선양화응격대단층세포통투성적영향(P＜0.05).결론 TDI현저증가HBEROS적산생,기유도적양화응격부분삼여지기관상피세포통투성적증가.저가능시TDI유발효천적발병궤제지일.
