湖南中医药大学学报
湖南中醫藥大學學報
호남중의약대학학보
JOURNAL OF HUNAN COLLEGE OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2011年
7期
6-10,17
,共6页
谢金魁%曹建国%张安强%王娟
謝金魁%曹建國%張安彊%王娟
사금괴%조건국%장안강%왕연
蛞蝓%蛞蝓提取物%肺癌细胞%凋亡%裸鼠
蛞蝓%蛞蝓提取物%肺癌細胞%凋亡%裸鼠
활유%활유제취물%폐암세포%조망%라서
目的 探讨蛞蝓提取物(EL-3)抗肺癌的作用机制.方法 (1)溴化尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法观察EL-3对人源性肺癌A549细胞的掺入抑制率；(2)吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色荧光显微镜,观察EL-3诱发A549凋亡细胞的形态,计数凋亡细胞；PI染色流式细胞术(FCM)分析细胞周期和凋亡率.(3)DNA琼脂糖凝胶电泳法,观察凋亡细胞“梯形”DNA条带；(4)免疫组化DAB染色法观察EL-3对PCNA、VEGF、CD31的蛋白表达的影响.结果 (1)单用蛞蝓提取物100 μg/mL浓度的EL-3对人肺癌细胞A549核酸合成抑制率(IR)高达63.59％;与空白对照组(0)和溶媒对照组(7.54％)比较差异有统计学意义（P＜0.01）,且呈剂量依赖性,其半数抑制浓度为28.53 μg/mL; (2)与化疗药合用有增效作用:EL-3与顺铂合用能显著提高顺铂对A549细胞的核酸合成抑制率:EL-3低、中、高剂量组,使单用DDP的IR由14.01％分别提高到44.5％、48.96％和67.05％(P＜0.01); IC50为20.62 μg/mL; EL-3与紫杉醇合用能显著提高紫杉醇对A549细胞的核酸合成抑制率.EL-3低、中、高剂量组使单用TAX对A.549细胞的IR由21.79％,分别提高到58.35％、66.13％和73.67％,差异有统计学意义（P＜0.05）,IC50值为7.41 μg/mL; (3)EL-3能有效地诱导A549细胞凋亡；(4)EL-3具有抑制裸鼠移植瘤细胞PCNA和VEGF及CD31蛋白表达作用.结论 EL-3抗肺癌的作用机制是多靶点复合性的有:(1)抑制肺癌细胞核酸合成；(2)诱导肺癌细胞凋亡；(3)抑制癌灶的血管生成和癌细胞对血管壁的黏附.
目的 探討蛞蝓提取物(EL-3)抗肺癌的作用機製.方法 (1)溴化尿嘧啶覈苷(BrdU)摻入法觀察EL-3對人源性肺癌A549細胞的摻入抑製率；(2)吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色熒光顯微鏡,觀察EL-3誘髮A549凋亡細胞的形態,計數凋亡細胞；PI染色流式細胞術(FCM)分析細胞週期和凋亡率.(3)DNA瓊脂糖凝膠電泳法,觀察凋亡細胞“梯形”DNA條帶；(4)免疫組化DAB染色法觀察EL-3對PCNA、VEGF、CD31的蛋白錶達的影響.結果 (1)單用蛞蝓提取物100 μg/mL濃度的EL-3對人肺癌細胞A549覈痠閤成抑製率(IR)高達63.59％;與空白對照組(0)和溶媒對照組(7.54％)比較差異有統計學意義（P＜0.01）,且呈劑量依賴性,其半數抑製濃度為28.53 μg/mL; (2)與化療藥閤用有增效作用:EL-3與順鉑閤用能顯著提高順鉑對A549細胞的覈痠閤成抑製率:EL-3低、中、高劑量組,使單用DDP的IR由14.01％分彆提高到44.5％、48.96％和67.05％(P＜0.01); IC50為20.62 μg/mL; EL-3與紫杉醇閤用能顯著提高紫杉醇對A549細胞的覈痠閤成抑製率.EL-3低、中、高劑量組使單用TAX對A.549細胞的IR由21.79％,分彆提高到58.35％、66.13％和73.67％,差異有統計學意義（P＜0.05）,IC50值為7.41 μg/mL; (3)EL-3能有效地誘導A549細胞凋亡；(4)EL-3具有抑製裸鼠移植瘤細胞PCNA和VEGF及CD31蛋白錶達作用.結論 EL-3抗肺癌的作用機製是多靶點複閤性的有:(1)抑製肺癌細胞覈痠閤成；(2)誘導肺癌細胞凋亡；(3)抑製癌竈的血管生成和癌細胞對血管壁的黏附.
목적 탐토활유제취물(EL-3)항폐암적작용궤제.방법 (1)추화뇨밀정핵감(BrdU)참입법관찰EL-3대인원성폐암A549세포적참입억제솔；(2)아정등/추화을정(AO/EB)염색형광현미경,관찰EL-3유발A549조망세포적형태,계수조망세포；PI염색류식세포술(FCM)분석세포주기화조망솔.(3)DNA경지당응효전영법,관찰조망세포“제형”DNA조대；(4)면역조화DAB염색법관찰EL-3대PCNA、VEGF、CD31적단백표체적영향.결과 (1)단용활유제취물100 μg/mL농도적EL-3대인폐암세포A549핵산합성억제솔(IR)고체63.59％;여공백대조조(0)화용매대조조(7.54％)비교차이유통계학의의（P＜0.01）,차정제량의뢰성,기반수억제농도위28.53 μg/mL; (2)여화료약합용유증효작용:EL-3여순박합용능현저제고순박대A549세포적핵산합성억제솔:EL-3저、중、고제량조,사단용DDP적IR유14.01％분별제고도44.5％、48.96％화67.05％(P＜0.01); IC50위20.62 μg/mL; EL-3여자삼순합용능현저제고자삼순대A549세포적핵산합성억제솔.EL-3저、중、고제량조사단용TAX대A.549세포적IR유21.79％,분별제고도58.35％、66.13％화73.67％,차이유통계학의의（P＜0.05）,IC50치위7.41 μg/mL; (3)EL-3능유효지유도A549세포조망；(4)EL-3구유억제라서이식류세포PCNA화VEGF급CD31단백표체작용.결론 EL-3항폐암적작용궤제시다파점복합성적유:(1)억제폐암세포핵산합성；(2)유도폐암세포조망；(3)억제암조적혈관생성화암세포대혈관벽적점부.
