北京农学院学报
北京農學院學報
북경농학원학보
JOURNAL OF BEIJING AGRICULTURAL COLLEGE
2011年
3期
31-34
,共4页
李华伟%武聚富%庄英华%高飞%吴国娟
李華偉%武聚富%莊英華%高飛%吳國娟
리화위%무취부%장영화%고비%오국연
传染性支气管炎病毒%鸡胚肾细胞%PCR%适应性
傳染性支氣管炎病毒%鷄胚腎細胞%PCR%適應性
전염성지기관염병독%계배신세포%PCR%괄응성
探明鸡传染性支气管炎病毒(Avian Infectious Bronchitis Virus,IBV)感染鸡胚肾细胞(Chicken Embryo Kidney Cells,CEK cell),并且实现其增殖为目的.将IBV稀释液注射到SPF鸡胚尿囊腔内,培养鸡胚扩繁,观察记录结果;并培养CEK细胞,采用100倍半数组织培养感染量的IBV进行染毒实验;应用Reed-Muench法计算半数鸡胚感染量为10-6.68/0.1 mL;用Real time PCR检测IBV在感染细胞中的含量,以确定IBV在CEKcells中已经感染且增殖成功.结果表明,接种10日龄的SPF鸡胚可以收集更多的、约8 mL的尿囊液毒;反复盲传至7代的IBV可使CEK cells产生明显的细胞病变效应;通过实时荧光定量PCR和RT-PCR检测,最终确定IBV-M41型扩繁成功并且能够在CEK细胞上繁殖,为下一步实验提供了参考.
探明鷄傳染性支氣管炎病毒(Avian Infectious Bronchitis Virus,IBV)感染鷄胚腎細胞(Chicken Embryo Kidney Cells,CEK cell),併且實現其增殖為目的.將IBV稀釋液註射到SPF鷄胚尿囊腔內,培養鷄胚擴繁,觀察記錄結果;併培養CEK細胞,採用100倍半數組織培養感染量的IBV進行染毒實驗;應用Reed-Muench法計算半數鷄胚感染量為10-6.68/0.1 mL;用Real time PCR檢測IBV在感染細胞中的含量,以確定IBV在CEKcells中已經感染且增殖成功.結果錶明,接種10日齡的SPF鷄胚可以收集更多的、約8 mL的尿囊液毒;反複盲傳至7代的IBV可使CEK cells產生明顯的細胞病變效應;通過實時熒光定量PCR和RT-PCR檢測,最終確定IBV-M41型擴繁成功併且能夠在CEK細胞上繁殖,為下一步實驗提供瞭參攷.
탐명계전염성지기관염병독(Avian Infectious Bronchitis Virus,IBV)감염계배신세포(Chicken Embryo Kidney Cells,CEK cell),병차실현기증식위목적.장IBV희석액주사도SPF계배뇨낭강내,배양계배확번,관찰기록결과;병배양CEK세포,채용100배반수조직배양감염량적IBV진행염독실험;응용Reed-Muench법계산반수계배감염량위10-6.68/0.1 mL;용Real time PCR검측IBV재감염세포중적함량,이학정IBV재CEKcells중이경감염차증식성공.결과표명,접충10일령적SPF계배가이수집경다적、약8 mL적뇨낭액독;반복맹전지7대적IBV가사CEK cells산생명현적세포병변효응;통과실시형광정량PCR화RT-PCR검측,최종학정IBV-M41형확번성공병차능구재CEK세포상번식,위하일보실험제공료삼고.
