安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
29期
17788-17789,17818
,共3页
甘草%DNA%RAPD-PCR%反应体系%优化%正交试验
甘草%DNA%RAPD-PCR%反應體繫%優化%正交試驗
감초%DNA%RAPD-PCR%반응체계%우화%정교시험
[目的]建立一套适合甘草分子学研究的RAPD-PCR反应体系.[方法]以甘草种质为试材,采用正交试验法设计,对影响RAPD-PCR扩增的主要因素dNTPs、引物、Taq酶和DNA模板进行优化筛选.[结果]总体积25μl的甘草RAPD-PCR最佳反应体系为:10 ×PCR缓冲液(含MgCl2 )2.5 μl,10 mmol/L dNTPs 2.5 μl,50 ng DNA 2.0μl,10 μmol/L引物2.0μl,5 U/μl Taq酶0.4μl.对引物的退火温度进行了梯度筛选,34℃时扩增效果较好.[结论]进行甘草RAPD-PCR反应体系的正交优化非常有效.
[目的]建立一套適閤甘草分子學研究的RAPD-PCR反應體繫.[方法]以甘草種質為試材,採用正交試驗法設計,對影響RAPD-PCR擴增的主要因素dNTPs、引物、Taq酶和DNA模闆進行優化篩選.[結果]總體積25μl的甘草RAPD-PCR最佳反應體繫為:10 ×PCR緩遲液(含MgCl2 )2.5 μl,10 mmol/L dNTPs 2.5 μl,50 ng DNA 2.0μl,10 μmol/L引物2.0μl,5 U/μl Taq酶0.4μl.對引物的退火溫度進行瞭梯度篩選,34℃時擴增效果較好.[結論]進行甘草RAPD-PCR反應體繫的正交優化非常有效.
[목적]건립일투괄합감초분자학연구적RAPD-PCR반응체계.[방법]이감초충질위시재,채용정교시험법설계,대영향RAPD-PCR확증적주요인소dNTPs、인물、Taq매화DNA모판진행우화사선.[결과]총체적25μl적감초RAPD-PCR최가반응체계위:10 ×PCR완충액(함MgCl2 )2.5 μl,10 mmol/L dNTPs 2.5 μl,50 ng DNA 2.0μl,10 μmol/L인물2.0μl,5 U/μl Taq매0.4μl.대인물적퇴화온도진행료제도사선,34℃시확증효과교호.[결론]진행감초RAPD-PCR반응체계적정교우화비상유효.
