作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2011年
8期
1406-1414
,共9页
石晓艳%曾彦达%李世龙%王玉波%马凤鸣%刁志伟
石曉豔%曾彥達%李世龍%王玉波%馬鳳鳴%刁誌偉
석효염%증언체%리세룡%왕옥파%마봉명%조지위
甜菜%亚硝酸还原酶%cDNA%克隆%基因表达
甜菜%亞硝痠還原酶%cDNA%剋隆%基因錶達
첨채%아초산환원매%cDNA%극륭%기인표체
以甜菜品种甜研7号叶片的cDNA为模板,采用RT-PCR和3'/5'RACE技术,获得了编码亚硝酸还原酶基因(NiR)的cDNA全序列2 014 bp,包含有l 830 bp的开放阅读框,编码599个氨基酸.所推导的氨基酸序列与菠菜及拟南芥NiR编码的氨基酸序列均具93%的同源性.生物信息学分析表明,甜菜NiR具有完整的NiR蛋白结构,含血红素蛋白β-化合物区域和4Fe-4S区域,并利用分析软件预测其三维结构.实时荧光定量结果显示,在以0、10、20、30、40、50、80和160 mmol L-1 NO3-N处理72 h的试验中,50 mmol L-1处理可使甜菜NiR的表达量达到最大；以0、2、4、8、16、32、64和128 mnol L-1 NH4+-N处理48 h的试验表明,8mmol L-1和64 mmol L-1处理条件下甜菜NiR表达量相对较高.硝态氮和铵态氮不同配比处理48 h的试验中,NO3--N和NH4+-N比例为80:20可使甜菜NiR的表达量达到最大；在氮素诱导的基础上,蛋白抑制剂放线菌酮处理9h,随着处理浓度的增大,NiR的表达量逐渐下降；不同浓度NO2-处理的试验中,40 mmol L-1处理下NiR的表达量最大.
以甜菜品種甜研7號葉片的cDNA為模闆,採用RT-PCR和3'/5'RACE技術,穫得瞭編碼亞硝痠還原酶基因(NiR)的cDNA全序列2 014 bp,包含有l 830 bp的開放閱讀框,編碼599箇氨基痠.所推導的氨基痠序列與菠菜及擬南芥NiR編碼的氨基痠序列均具93%的同源性.生物信息學分析錶明,甜菜NiR具有完整的NiR蛋白結構,含血紅素蛋白β-化閤物區域和4Fe-4S區域,併利用分析軟件預測其三維結構.實時熒光定量結果顯示,在以0、10、20、30、40、50、80和160 mmol L-1 NO3-N處理72 h的試驗中,50 mmol L-1處理可使甜菜NiR的錶達量達到最大；以0、2、4、8、16、32、64和128 mnol L-1 NH4+-N處理48 h的試驗錶明,8mmol L-1和64 mmol L-1處理條件下甜菜NiR錶達量相對較高.硝態氮和銨態氮不同配比處理48 h的試驗中,NO3--N和NH4+-N比例為80:20可使甜菜NiR的錶達量達到最大；在氮素誘導的基礎上,蛋白抑製劑放線菌酮處理9h,隨著處理濃度的增大,NiR的錶達量逐漸下降；不同濃度NO2-處理的試驗中,40 mmol L-1處理下NiR的錶達量最大.
이첨채품충첨연7호협편적cDNA위모판,채용RT-PCR화3'/5'RACE기술,획득료편마아초산환원매기인(NiR)적cDNA전서렬2 014 bp,포함유l 830 bp적개방열독광,편마599개안기산.소추도적안기산서렬여파채급의남개NiR편마적안기산서렬균구93%적동원성.생물신식학분석표명,첨채NiR구유완정적NiR단백결구,함혈홍소단백β-화합물구역화4Fe-4S구역,병이용분석연건예측기삼유결구.실시형광정량결과현시,재이0、10、20、30、40、50、80화160 mmol L-1 NO3-N처리72 h적시험중,50 mmol L-1처리가사첨채NiR적표체량체도최대；이0、2、4、8、16、32、64화128 mnol L-1 NH4+-N처리48 h적시험표명,8mmol L-1화64 mmol L-1처리조건하첨채NiR표체량상대교고.초태담화안태담불동배비처리48 h적시험중,NO3--N화NH4+-N비례위80:20가사첨채NiR적표체량체도최대；재담소유도적기출상,단백억제제방선균동처리9h,수착처리농도적증대,NiR적표체량축점하강；불동농도NO2-처리적시험중,40 mmol L-1처리하NiR적표체량최대.
