安徽医药
安徽醫藥
안휘의약
ANHUI MEDICAL AND PHARMACEUTICAL JOURNAL
2012年
5期
576-578
,共3页
李泰明%庄舰峰%Jean Louis Didier MEKOO%谷春娇%邢芸%刘景晶
李泰明%莊艦峰%Jean Louis Didier MEKOO%穀春嬌%邢蕓%劉景晶
리태명%장함봉%Jean Louis Didier MEKOO%곡춘교%형예%류경정
黑曲霉%β-葡萄糖苷酶%纤维二糖
黑麯黴%β-葡萄糖苷酶%纖維二糖
흑곡매%β-포도당감매%섬유이당
目的 构建糖类标记载体筛选克隆.方法 以pPIC9K-βG12为模板,通过PCR扩增得到全长的Bgl2基因片段,克隆至pET-28a载体,转化E.coli BL21(DE3),cel-M9培养基筛选阳性克隆,经DNA测序分析,成功构建pET28a-Bgl2表达载体.SDS-PAGE显示,重组菌经IPTG诱导后表达了目的 蛋白,其相对分子质量与预期结果 相符.结果 PCR扩增得到Bgl2基因片段,SDS-PAGE显示蛋白以包涵体形式表达,克隆可用Cel-M9培养基筛选.结论 用Cel-M9培养基筛选出阳性克隆为构建食品级载体奠定基础.
目的 構建糖類標記載體篩選剋隆.方法 以pPIC9K-βG12為模闆,通過PCR擴增得到全長的Bgl2基因片段,剋隆至pET-28a載體,轉化E.coli BL21(DE3),cel-M9培養基篩選暘性剋隆,經DNA測序分析,成功構建pET28a-Bgl2錶達載體.SDS-PAGE顯示,重組菌經IPTG誘導後錶達瞭目的 蛋白,其相對分子質量與預期結果 相符.結果 PCR擴增得到Bgl2基因片段,SDS-PAGE顯示蛋白以包涵體形式錶達,剋隆可用Cel-M9培養基篩選.結論 用Cel-M9培養基篩選齣暘性剋隆為構建食品級載體奠定基礎.
목적 구건당류표기재체사선극륭.방법 이pPIC9K-βG12위모판,통과PCR확증득도전장적Bgl2기인편단,극륭지pET-28a재체,전화E.coli BL21(DE3),cel-M9배양기사선양성극륭,경DNA측서분석,성공구건pET28a-Bgl2표체재체.SDS-PAGE현시,중조균경IPTG유도후표체료목적 단백,기상대분자질량여예기결과 상부.결과 PCR확증득도Bgl2기인편단,SDS-PAGE현시단백이포함체형식표체,극륭가용Cel-M9배양기사선.결론 용Cel-M9배양기사선출양성극륭위구건식품급재체전정기출.