食品研究与开发
食品研究與開髮
식품연구여개발
FOOD RESEARCH AND CEVELOPMENT
2012年
5期
25-29
,共5页
肖厚荣%杨红%王中风%翟伟华
肖厚榮%楊紅%王中風%翟偉華
초후영%양홍%왕중풍%적위화
猪肝%超氧化物歧化酶(SOD)%分离纯化%表征
豬肝%超氧化物歧化酶(SOD)%分離純化%錶徵
저간%초양화물기화매(SOD)%분리순화%표정
研究猪肝SOD的分离提取、纯化以及初步表征.以猪肝为原料,通过抽提液加热、丙酮沉淀和Sephadex G200层析柱色谱提取、纯化Cu,Zn-SOD;在单因素试验的基础上,采用L9(34)设计对提取工艺进行系统优化.结果表明:经过热变性,可以除去大部分杂蛋白,提高了SOD的比活力；最佳的提取条件是:在1.4％的盐浓度下,于70℃水浴中热变性10 min,然后加1.6倍体积的丙酮获得SOD粗沉淀；溶解后的粗酶液经Sephadex G-200层析柱纯化后,经SDS-PAGE电泳检测为单一条带,HPLC检测显示为单一对称峰,均表明最终得到了高纯度的SOD；紫外-可见吸收光谱和ICP-MS分析结果均表明得到的是含铜、锌的SOD,即Cu,Zn-SOD；以邻苯三酚为底物,该酶的Km值为1.574,Vmax为0.268.
研究豬肝SOD的分離提取、純化以及初步錶徵.以豬肝為原料,通過抽提液加熱、丙酮沉澱和Sephadex G200層析柱色譜提取、純化Cu,Zn-SOD;在單因素試驗的基礎上,採用L9(34)設計對提取工藝進行繫統優化.結果錶明:經過熱變性,可以除去大部分雜蛋白,提高瞭SOD的比活力；最佳的提取條件是:在1.4％的鹽濃度下,于70℃水浴中熱變性10 min,然後加1.6倍體積的丙酮穫得SOD粗沉澱；溶解後的粗酶液經Sephadex G-200層析柱純化後,經SDS-PAGE電泳檢測為單一條帶,HPLC檢測顯示為單一對稱峰,均錶明最終得到瞭高純度的SOD；紫外-可見吸收光譜和ICP-MS分析結果均錶明得到的是含銅、鋅的SOD,即Cu,Zn-SOD；以鄰苯三酚為底物,該酶的Km值為1.574,Vmax為0.268.
연구저간SOD적분리제취、순화이급초보표정.이저간위원료,통과추제액가열、병동침정화Sephadex G200층석주색보제취、순화Cu,Zn-SOD;재단인소시험적기출상,채용L9(34)설계대제취공예진행계통우화.결과표명:경과열변성,가이제거대부분잡단백,제고료SOD적비활력；최가적제취조건시:재1.4％적염농도하,우70℃수욕중열변성10 min,연후가1.6배체적적병동획득SOD조침정；용해후적조매액경Sephadex G-200층석주순화후,경SDS-PAGE전영검측위단일조대,HPLC검측현시위단일대칭봉,균표명최종득도료고순도적SOD；자외-가견흡수광보화ICP-MS분석결과균표명득도적시함동、자적SOD,즉Cu,Zn-SOD；이린분삼분위저물,해매적Km치위1.574,Vmax위0.268.
