CAJ | 학술논문

目的研究沙培林治疗裸鼠脑胶质瘤基因的PCR检测.方法 16只BALB/C裸小鼠皮下接种U251脑胶质瘤成功后随机分为4组,每组四只.接种后10 d,肿瘤长至约3～4 mm大小时开始给药,对照组0.2 ml生理盐水,低剂量组沙培林0.2 KE、中剂量组0.4 KE、高荆量组0.8 KE,隔日1次,瘤周注射.给药8次后解瘤实验.从组织中提取总RNA,取20 mg组织加液氮,匀浆研磨,加入TRIZOL裂解液1 ml,采用一步法抽取总RNA,经由紫外分光光度计比色鉴定RNA纯度与浓度,结果在1.9～2.0之间.逆转录(RT):各取总RNA 1.5、、μg,在终体积为20μl反应条件下,-37℃逆转录1 h,-94℃预变性5 min,获得单链cDNA模板.PCR:各取模板cDNA 2μl,据不同检测对象设计引物,分别进行终体积为30μl的PCR反应,扩增30～50个循环.结果不同组U251瘤细胞Fas、Bc1-2、Bcl-x、Bax、P53的mRNA从左至右依次为C1、C2、L1、L2、M1、M2、H1、H2、Marker,Bcl-2及P53(突变型)的表达由C至L、M、H逐渐下降,而Bax、Fas及Bcl-xs的表达则又由C至L、M、H逐渐升高.结论不同基因rt-PCR的检测结果同样证实了沙培林对脑胶质瘤患者瘤细胞凋亡的调控作用.它是通过上调促凋亡基因Bax、Fas、Bcl-xs及下调抗凋亡基因Bcl-2、P53(突变型)而发挥杀伤瘤细胞、抑制其生长的.
목적 연구사배림치료라서뇌효질류기인적PCR검측.방법 16지BALB/C라소서피하접충U251뇌효질류성공후수궤분위4조,매조사지.접충후10 d,종류장지약3～4 mm대소시개시급약,대조조0.2 ml생리염수,저제량조사배림0.2 KE、중제량조0.4 KE、고형량조0.8 KE,격일1차,류주주사.급약8차후해류실험.종조직중제취총RNA,취20 mg조직가액담,균장연마,가입TRIZOL렬해액1 ml,채용일보법추취총RNA,경유자외분광광도계비색감정RNA순도여농도,결과 재1.9～2.0지간.역전록(RT):각취총RNA 1.5、、μg,재종체적위20μl반응조건하,-37℃역전록1 h,-94℃예변성5 min,획득단련cDNA모판.PCR:각취모판cDNA 2μl,거불동검측대상설계인물,분별진행종체적위30μl적PCR반응,확증30～50개순배.결과 불동조U251류세포Fas、Bc1-2、Bcl-x、Bax、P53적mRNA종좌지우의차위C1、C2、L1、L2、M1、M2、H1、H2、Marker,Bcl-2급P53(돌변형)적표체유C지L、M、H축점하강,이Bax、Fas급Bcl-xs적표체칙우유C지L、M、H축점승고.결론 불동기인rt-PCR적검측결과 동양증실료사배림대뇌효질류환자류세포조망적조공작용.타시통과상조촉조망기인Bax、Fas、Bcl-xs급하조항조망기인Bcl-2、P53(돌변형)이발휘살상류세포、억제기생장적.