CAJ | 학술논문

目的构建柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1与白细胞介素-15(interleukin-15,IL-15)双表达基因疫苗,并观察其对小鼠的免疫效果.方法从CVB3 VP1基因的重组质粒pcDNA3/VP1上扩增出带有完整表达构件的VP1基因,克隆至IL-15基因重组质粒pcDNA3/IL-15,构建成双表达重组质粒pcDNA3/VP1-IL-15,转化DH5a大肠杆菌,大量扩增后,肌内注射Balb/c小鼠, 1次/周,共3次,每次免疫后第6天取血清,用微量中和试验方法检测血清中和抗体.第3次免疫后的第7天,用800TCID50 CVB3 感染小鼠,观察各组小鼠的生存情况.结果构建的pcDNA3/VP1-IL-15重组质粒目的基因与CVB3-VP1和IL-15的序列相同;免疫小鼠后pcDNA3/VP1-IL-15重组质粒能诱导机体产生中和抗体,抗体滴度随免疫次数增加而提高;病毒攻击后pcDNA3/VP1-IL-15和pcDNA3/VP1+pcDNA3/ IL-15组较其他组生存时间明显延长(P<0.05).结论本研究成功构建了pcDNA3/VP1-IL-15真核双表达重组质粒;该质粒能诱导机体产生中和抗体,对CVB3毒株的攻击有一定程度的保护作用.
목적구건가살기병독B3(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1여백세포개소-15(interleukin-15,IL-15)쌍표체기인역묘,병관찰기대소서적면역효과.방법종CVB3 VP1기인적중조질립pcDNA3/VP1상확증출대유완정표체구건적VP1기인,극륭지IL-15기인중조질립pcDNA3/IL-15,구건성쌍표체중조질립pcDNA3/VP1-IL-15,전화DH5a대장간균,대량확증후,기내주사Balb/c소서, 1차/주,공3차,매차면역후제6천취혈청,용미량중화시험방법검측혈청중화항체.제3차면역후적제7천,용800TCID50 CVB3 감염소서,관찰각조소서적생존정황.결과구건적pcDNA3/VP1-IL-15중조질립목적기인여CVB3-VP1화IL-15적서렬상동;면역소서후pcDNA3/VP1-IL-15중조질립능유도궤체산생중화항체,항체적도수면역차수증가이제고;병독공격후pcDNA3/VP1-IL-15화pcDNA3/VP1+pcDNA3/ IL-15조교기타조생존시간명현연장(P<0.05).결론본연구성공구건료pcDNA3/VP1-IL-15진핵쌍표체중조질립;해질립능유도궤체산생중화항체,대CVB3독주적공격유일정정도적보호작용.