CAJ | 학술논문

目的:构建真核表达的pEGFP-C1与大鼠睾丸AQP7的融合蛋白表达载体.方法:RT-PCR的方法扩增Wistar大鼠睾丸AQP7cDNA编码区全长序列,测序鉴定,将AQP7cDNA融合于pEGFP-C1基因的下游.以脂质体转染方法将pEGFP-C1-AQP7融合蛋白转入中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,应用免疫细胞化学方法和Western印迹技术对转染细胞株进行鉴定.结果:①Wistar大鼠AQP7cDNA序列登录到GenBank,登录号:AY157737;②通过鉴定证明CHO细胞已经稳定表达了pEGFP-C1-AQP7融合蛋白,其相对分子质量为53000;③绿色荧光蛋白作为标记物观察到AQP7在CHO细胞的定位.结论:稳定表达pEGFP-C1-AQP7融合蛋白的CHO细胞株的建立,为AQP7在细胞内定位与功能研究奠定了基础.
목적:구건진핵표체적pEGFP-C1여대서고환AQP7적융합단백표체재체.방법:RT-PCR적방법확증Wistar대서고환AQP7cDNA편마구전장서렬,측서감정,장AQP7cDNA융합우pEGFP-C1기인적하유.이지질체전염방법장pEGFP-C1-AQP7융합단백전입중국창서란소(CHO)세포,응용면역세포화학방법화Western인적기술대전염세포주진행감정.결과:①Wistar대서AQP7cDNA서렬등록도GenBank,등록호:AY157737;②통과감정증명CHO세포이경은정표체료pEGFP-C1-AQP7융합단백,기상대분자질량위53000;③록색형광단백작위표기물관찰도AQP7재CHO세포적정위.결론:은정표체pEGFP-C1-AQP7융합단백적CHO세포주적건립,위AQP7재세포내정위여공능연구전정료기출.