首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2006年
2期
206-209
,共4页
油红捷%毋晓涛%潘颖%王泽生
油紅捷%毌曉濤%潘穎%王澤生
유홍첩%무효도%반영%왕택생
RT-PCR%嗜铬颗粒蛋白B%基因表达
RT-PCR%嗜鉻顆粒蛋白B%基因錶達
RT-PCR%기락과립단백B%기인표체
目的构建小鼠嗜铬颗粒蛋白B(chromogranm B,CgB)重组原核表达载体.方法先用RT-PCR方法从小鼠脑基因组中扩增出CgB基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pMD-T vector,经DNA测序证实基因碱基无误后,亚克隆到原核表达质粒pGEX-4T-1中进行表达.结果表达产物经Western Blot分析,在140处有一明显特异带,与预期结果相符.结论构建重组融合表达载体pGEX-CgB,在原核细胞中成功表达出小鼠CgB-GST融合蛋白.
目的構建小鼠嗜鉻顆粒蛋白B(chromogranm B,CgB)重組原覈錶達載體.方法先用RT-PCR方法從小鼠腦基因組中擴增齣CgB基因cDNA序列,應用T-A剋隆技術,剋隆到質粒pMD-T vector,經DNA測序證實基因堿基無誤後,亞剋隆到原覈錶達質粒pGEX-4T-1中進行錶達.結果錶達產物經Western Blot分析,在140處有一明顯特異帶,與預期結果相符.結論構建重組融閤錶達載體pGEX-CgB,在原覈細胞中成功錶達齣小鼠CgB-GST融閤蛋白.
목적구건소서기락과립단백B(chromogranm B,CgB)중조원핵표체재체.방법선용RT-PCR방법종소서뇌기인조중확증출CgB기인cDNA서렬,응용T-A극륭기술,극륭도질립pMD-T vector,경DNA측서증실기인감기무오후,아극륭도원핵표체질립pGEX-4T-1중진행표체.결과표체산물경Western Blot분석,재140처유일명현특이대,여예기결과상부.결론구건중조융합표체재체pGEX-CgB,재원핵세포중성공표체출소서CgB-GST융합단백.
