南京医科大学学报（自然科学版）
南京醫科大學學報（自然科學版）
남경의과대학학보（자연과학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING
2006年
4期
262-264,封四
,共4页
刘金龙%郭仕英%刘训良%李朝军%杜青%郭治源%夏建国
劉金龍%郭仕英%劉訓良%李朝軍%杜青%郭治源%夏建國
류금룡%곽사영%류훈량%리조군%두청%곽치원%하건국
腺病毒载体%Egr-1%TK自杀基因
腺病毒載體%Egr-1%TK自殺基因
선병독재체%Egr-1%TK자살기인
目的:构建以GFP做标志基因的放射敏感基因Egr-1调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(herps simplex virus thymidine kinase,TK)的腺病毒载体.方法:以PCl-neo-Egr-1-TK(pET)为模板扩增Egr-1,插入到pAdTrack的XbaI和XhoI位点,构建重组质粒pAdTrack/Egr-1;与pET酶切获得TKcDNA相连,构成pAdTrack/Egr-1-TK;用PmeI酶切后与pAdEasy-1混合,应用细菌内同源重组法获得重组表达质粒pAdEgr-1-TK.结果:重组表达质粒pAdEgr-1-TK的酶切鉴定符合预期结果,感染肿瘤细胞可见绿色荧光表达.结论:通过细菌内同源重组成功构建含GFP做标志基因的pAdEgr-1-TK重组表达质粒,为研究Egr-1调控自杀基因及对肿瘤细胞进行灭活打下了基础.
目的:構建以GFP做標誌基因的放射敏感基因Egr-1調控單純皰疹病毒胸苷激酶基因(herps simplex virus thymidine kinase,TK)的腺病毒載體.方法:以PCl-neo-Egr-1-TK(pET)為模闆擴增Egr-1,插入到pAdTrack的XbaI和XhoI位點,構建重組質粒pAdTrack/Egr-1;與pET酶切穫得TKcDNA相連,構成pAdTrack/Egr-1-TK;用PmeI酶切後與pAdEasy-1混閤,應用細菌內同源重組法穫得重組錶達質粒pAdEgr-1-TK.結果:重組錶達質粒pAdEgr-1-TK的酶切鑒定符閤預期結果,感染腫瘤細胞可見綠色熒光錶達.結論:通過細菌內同源重組成功構建含GFP做標誌基因的pAdEgr-1-TK重組錶達質粒,為研究Egr-1調控自殺基因及對腫瘤細胞進行滅活打下瞭基礎.
목적:구건이GFP주표지기인적방사민감기인Egr-1조공단순포진병독흉감격매기인(herps simplex virus thymidine kinase,TK)적선병독재체.방법:이PCl-neo-Egr-1-TK(pET)위모판확증Egr-1,삽입도pAdTrack적XbaI화XhoI위점,구건중조질립pAdTrack/Egr-1;여pET매절획득TKcDNA상련,구성pAdTrack/Egr-1-TK;용PmeI매절후여pAdEasy-1혼합,응용세균내동원중조법획득중조표체질립pAdEgr-1-TK.결과:중조표체질립pAdEgr-1-TK적매절감정부합예기결과,감염종류세포가견록색형광표체.결론:통과세균내동원중조성공구건함GFP주표지기인적pAdEgr-1-TK중조표체질립,위연구Egr-1조공자살기인급대종류세포진행멸활타하료기출.
