中国微生态学杂志
中國微生態學雜誌
중국미생태학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROECOLOGY
2007年
5期
413-416
,共4页
任月%袁杰利%卢行安%岳慧
任月%袁傑利%盧行安%嶽慧
임월%원걸리%로행안%악혜
肠球菌%荧光定量PCR%粪便
腸毬菌%熒光定量PCR%糞便
장구균%형광정량PCR%분편
目的 利用TaqMan荧光定量PCR方法,建立肠球菌实时荧光PCR检测方法,并初步应用于粪便中肠球菌的检测.方法 根据GenBank发表的肠球菌23S rRNA基因序列的保守区域参考国外文献设计合成特异性的引物和探针[1];利用构建的质粒标准品优化Mg2+的浓度和引物探针浓度,并考核检测体系的保守性、灵敏性和重复性;初步应用于粪便标本的检测分析.结果 Mg2+终浓度为4.5 mmol/L,上下游引物终浓度为0.4 μmol/L,灵敏度为6拷贝数/反应;绘制两种标准曲线,构建了基因拷贝数、细菌数为分析指标的定量分析模型,检测粪便标本结果显示TaqMan荧光定量PCR方法较平板计数法敏感、快捷、简便.结论 本研究建立了一种灵敏、特异、简便易行的肠球菌定量检测方法.
目的 利用TaqMan熒光定量PCR方法,建立腸毬菌實時熒光PCR檢測方法,併初步應用于糞便中腸毬菌的檢測.方法 根據GenBank髮錶的腸毬菌23S rRNA基因序列的保守區域參攷國外文獻設計閤成特異性的引物和探針[1];利用構建的質粒標準品優化Mg2+的濃度和引物探針濃度,併攷覈檢測體繫的保守性、靈敏性和重複性;初步應用于糞便標本的檢測分析.結果 Mg2+終濃度為4.5 mmol/L,上下遊引物終濃度為0.4 μmol/L,靈敏度為6拷貝數/反應;繪製兩種標準麯線,構建瞭基因拷貝數、細菌數為分析指標的定量分析模型,檢測糞便標本結果顯示TaqMan熒光定量PCR方法較平闆計數法敏感、快捷、簡便.結論 本研究建立瞭一種靈敏、特異、簡便易行的腸毬菌定量檢測方法.
목적 이용TaqMan형광정량PCR방법,건립장구균실시형광PCR검측방법,병초보응용우분편중장구균적검측.방법 근거GenBank발표적장구균23S rRNA기인서렬적보수구역삼고국외문헌설계합성특이성적인물화탐침[1];이용구건적질립표준품우화Mg2+적농도화인물탐침농도,병고핵검측체계적보수성、령민성화중복성;초보응용우분편표본적검측분석.결과 Mg2+종농도위4.5 mmol/L,상하유인물종농도위0.4 μmol/L,령민도위6고패수/반응;회제량충표준곡선,구건료기인고패수、세균수위분석지표적정량분석모형,검측분편표본결과현시TaqMan형광정량PCR방법교평판계수법민감、쾌첩、간편.결론 본연구건립료일충령민、특이、간편역행적장구균정량검측방법.
