重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2010年
1期
40-42
,共3页
郑秀惠%李力%郭建新%郑英如%李军果%林爽%陈竹钦
鄭秀惠%李力%郭建新%鄭英如%李軍果%林爽%陳竹欽
정수혜%리력%곽건신%정영여%리군과%림상%진죽흠
人乳头瘤病毒16型%C3d3%DNA疫苗
人乳頭瘤病毒16型%C3d3%DNA疫苗
인유두류병독16형%C3d3%DNA역묘
目的 构建可作为DNA疫苗的包含人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6E7与C3d3 融合基因真核表达质粒,并在体外进行表达和鉴定.方法 采用PCR 技术扩增HPV16 E6E7片段,将该片段插入到pMDT-18载体中后,亚克隆至真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL和pSG.SS.YL,构建E6E7与C3d3 融合基因及E6E7表达质粒pSG.SS.E6E7.C3d3.YL和pSG.SS.E6E7.YL.经限制性酶切鉴定和DNA 序列测定后,将重组质粒pSG.SS.E6E7.C3d3.YL、pSG.SS.E6E7.YL转染COS-7细胞,用Western blot及免疫细胞化学技术检测其表达.结果 经酶切、DNA测序及转染真核细胞后表达产物的鉴定结果显示,重组质粒构建成功.结论 构建的质粒可在真核细胞内正确表达,为其作为DNA疫苗诱导免疫效应的动物实验打下了基础.
目的 構建可作為DNA疫苗的包含人乳頭瘤病毒16型(HPV16)E6E7與C3d3 融閤基因真覈錶達質粒,併在體外進行錶達和鑒定.方法 採用PCR 技術擴增HPV16 E6E7片段,將該片段插入到pMDT-18載體中後,亞剋隆至真覈錶達載體pSG.SS.C3d3.YL和pSG.SS.YL,構建E6E7與C3d3 融閤基因及E6E7錶達質粒pSG.SS.E6E7.C3d3.YL和pSG.SS.E6E7.YL.經限製性酶切鑒定和DNA 序列測定後,將重組質粒pSG.SS.E6E7.C3d3.YL、pSG.SS.E6E7.YL轉染COS-7細胞,用Western blot及免疫細胞化學技術檢測其錶達.結果 經酶切、DNA測序及轉染真覈細胞後錶達產物的鑒定結果顯示,重組質粒構建成功.結論 構建的質粒可在真覈細胞內正確錶達,為其作為DNA疫苗誘導免疫效應的動物實驗打下瞭基礎.
목적 구건가작위DNA역묘적포함인유두류병독16형(HPV16)E6E7여C3d3 융합기인진핵표체질립,병재체외진행표체화감정.방법 채용PCR 기술확증HPV16 E6E7편단,장해편단삽입도pMDT-18재체중후,아극륭지진핵표체재체pSG.SS.C3d3.YL화pSG.SS.YL,구건E6E7여C3d3 융합기인급E6E7표체질립pSG.SS.E6E7.C3d3.YL화pSG.SS.E6E7.YL.경한제성매절감정화DNA 서렬측정후,장중조질립pSG.SS.E6E7.C3d3.YL、pSG.SS.E6E7.YL전염COS-7세포,용Western blot급면역세포화학기술검측기표체.결과 경매절、DNA측서급전염진핵세포후표체산물적감정결과현시,중조질립구건성공.결론 구건적질립가재진핵세포내정학표체,위기작위DNA역묘유도면역효응적동물실험타하료기출.
