生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2010年
3期
310-314
,共5页
张钫%郑丽舒%袁武梅%王翔%薛鹏浩%麻粉莲%张骞
張鈁%鄭麗舒%袁武梅%王翔%薛鵬浩%痳粉蓮%張鶱
장방%정려서%원무매%왕상%설붕호%마분련%장건
重组人干扰素λ1%表达%纯化%抗病毒活性%抗增殖活性
重組人榦擾素λ1%錶達%純化%抗病毒活性%抗增殖活性
중조인간우소λ1%표체%순화%항병독활성%항증식활성
目的:利用大肠杆菌系统表达重组人Ⅲ型干扰素λ1(rhIFN-λ1),并进行纯化,以比较其与重组人干扰素-α2b(rhIFN-α2b)生物学活性的差异.方法:密码子优化的rhIFN-λ1基因与pET-44a载体连接构建原核表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物经系列层析纯化;采用细胞病变抑制法比较纯化的rhIFN-λ1与rhIFN-α2b、市售rhIFN-λ1的抗病毒活性;采用MTS法比较这些干扰素的抗肿瘤细胞增殖活性.结果:基因优化后的rhIFN-λ1在大肠杆菌中得以高效表达,用所建立的纯化工艺可制备得到纯度达95.7%的rhIFN-λ1;rhIFN-λ1的抗病毒比活性为3.2×105 U/mg,比市售rhIFN-λ1的比活性(1.1×105 U/mg)略高,抗肿瘤细胞增殖活性为rhIFN-α2b的1.7倍.结论:获得的rhIFN-λ1具有剂量依赖的抗病毒活性和抗增殖活性,其抗病毒活性比市售rhIFN-λ1略高,抗细胞增殖活性高于rhIFN-α2b,提示rhIFN-λ1有较大的应用前景.
目的:利用大腸桿菌繫統錶達重組人Ⅲ型榦擾素λ1(rhIFN-λ1),併進行純化,以比較其與重組人榦擾素-α2b(rhIFN-α2b)生物學活性的差異.方法:密碼子優化的rhIFN-λ1基因與pET-44a載體連接構建原覈錶達質粒,在大腸桿菌BL21(DE3)中錶達,錶達產物經繫列層析純化;採用細胞病變抑製法比較純化的rhIFN-λ1與rhIFN-α2b、市售rhIFN-λ1的抗病毒活性;採用MTS法比較這些榦擾素的抗腫瘤細胞增殖活性.結果:基因優化後的rhIFN-λ1在大腸桿菌中得以高效錶達,用所建立的純化工藝可製備得到純度達95.7%的rhIFN-λ1;rhIFN-λ1的抗病毒比活性為3.2×105 U/mg,比市售rhIFN-λ1的比活性(1.1×105 U/mg)略高,抗腫瘤細胞增殖活性為rhIFN-α2b的1.7倍.結論:穫得的rhIFN-λ1具有劑量依賴的抗病毒活性和抗增殖活性,其抗病毒活性比市售rhIFN-λ1略高,抗細胞增殖活性高于rhIFN-α2b,提示rhIFN-λ1有較大的應用前景.
목적:이용대장간균계통표체중조인Ⅲ형간우소λ1(rhIFN-λ1),병진행순화,이비교기여중조인간우소-α2b(rhIFN-α2b)생물학활성적차이.방법:밀마자우화적rhIFN-λ1기인여pET-44a재체련접구건원핵표체질립,재대장간균BL21(DE3)중표체,표체산물경계렬층석순화;채용세포병변억제법비교순화적rhIFN-λ1여rhIFN-α2b、시수rhIFN-λ1적항병독활성;채용MTS법비교저사간우소적항종류세포증식활성.결과:기인우화후적rhIFN-λ1재대장간균중득이고효표체,용소건립적순화공예가제비득도순도체95.7%적rhIFN-λ1;rhIFN-λ1적항병독비활성위3.2×105 U/mg,비시수rhIFN-λ1적비활성(1.1×105 U/mg)략고,항종류세포증식활성위rhIFN-α2b적1.7배.결론:획득적rhIFN-λ1구유제량의뢰적항병독활성화항증식활성,기항병독활성비시수rhIFN-λ1략고,항세포증식활성고우rhIFN-α2b,제시rhIFN-λ1유교대적응용전경.
