畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2010年
10期
1246-1252
,共7页
任子利%赵彦玲%杨小淦%陆阳清%卢晟盛%卢克焕
任子利%趙彥玲%楊小淦%陸暘清%盧晟盛%盧剋煥
임자리%조언령%양소감%륙양청%로성성%로극환
猪%卵母细胞%手工克隆%体细胞核移植
豬%卵母細胞%手工剋隆%體細胞覈移植
저%란모세포%수공극륭%체세포핵이식
通过对猪体细胞核移植中电融合及联合化学激活对猪重构胚发育能力进行探讨,为广西巴马小型猪的手工克隆搭建平台.利用手工克隆(HMC)技术对猪体细胞核移植胚胎采用不同的电融合方法和融合后化学激活不同时间,研究猪手工克隆胚胎的发育能力.结果表明:(1)对重构胚进行一步法电融合时,参数2(180 V·mm-1,30μs×1次)与参数1(160·mm-1,30 μs×1次)两组间的融合率差异显著(65.31%VS 58.33%,P<0.05);(2)对重构胚进行两步法融合时,参数3(第一次:180 V·mm-1,10μs×1次,融合60 min后进行第二次融合;第二次:85V·mm-1,80 μs×1次)和参数4(第一次:200 V·mm-1,10μs×1次,融合60 min后进行第二次融合;第二次:85V·mm-1,80μs×1次)两组间的总融合率差异不显著(75.88%vs 81.20%,P>0.05);(3)采用参数4与采用参数2融合的重构胚其分裂率和囊胚率均差异不显著((79.98%vs 72.66%)和(13.14%vs 9.36%),P>0.05);(4)在电激活和CHX+CB联合激活4、5、6 h这3组中.其分裂率和囊胚率均差异不显著(P>0.05).相对而言,重构胚采用参数4的两步融合法和CHX+CB激活5 h效果较好.
通過對豬體細胞覈移植中電融閤及聯閤化學激活對豬重構胚髮育能力進行探討,為廣西巴馬小型豬的手工剋隆搭建平檯.利用手工剋隆(HMC)技術對豬體細胞覈移植胚胎採用不同的電融閤方法和融閤後化學激活不同時間,研究豬手工剋隆胚胎的髮育能力.結果錶明:(1)對重構胚進行一步法電融閤時,參數2(180 V·mm-1,30μs×1次)與參數1(160·mm-1,30 μs×1次)兩組間的融閤率差異顯著(65.31%VS 58.33%,P<0.05);(2)對重構胚進行兩步法融閤時,參數3(第一次:180 V·mm-1,10μs×1次,融閤60 min後進行第二次融閤;第二次:85V·mm-1,80 μs×1次)和參數4(第一次:200 V·mm-1,10μs×1次,融閤60 min後進行第二次融閤;第二次:85V·mm-1,80μs×1次)兩組間的總融閤率差異不顯著(75.88%vs 81.20%,P>0.05);(3)採用參數4與採用參數2融閤的重構胚其分裂率和囊胚率均差異不顯著((79.98%vs 72.66%)和(13.14%vs 9.36%),P>0.05);(4)在電激活和CHX+CB聯閤激活4、5、6 h這3組中.其分裂率和囊胚率均差異不顯著(P>0.05).相對而言,重構胚採用參數4的兩步融閤法和CHX+CB激活5 h效果較好.
통과대저체세포핵이식중전융합급연합화학격활대저중구배발육능력진행탐토,위엄서파마소형저적수공극륭탑건평태.이용수공극륭(HMC)기술대저체세포핵이식배태채용불동적전융합방법화융합후화학격활불동시간,연구저수공극륭배태적발육능력.결과표명:(1)대중구배진행일보법전융합시,삼수2(180 V·mm-1,30μs×1차)여삼수1(160·mm-1,30 μs×1차)량조간적융합솔차이현저(65.31%VS 58.33%,P<0.05);(2)대중구배진행량보법융합시,삼수3(제일차:180 V·mm-1,10μs×1차,융합60 min후진행제이차융합;제이차:85V·mm-1,80 μs×1차)화삼수4(제일차:200 V·mm-1,10μs×1차,융합60 min후진행제이차융합;제이차:85V·mm-1,80μs×1차)량조간적총융합솔차이불현저(75.88%vs 81.20%,P>0.05);(3)채용삼수4여채용삼수2융합적중구배기분렬솔화낭배솔균차이불현저((79.98%vs 72.66%)화(13.14%vs 9.36%),P>0.05);(4)재전격활화CHX+CB연합격활4、5、6 h저3조중.기분렬솔화낭배솔균차이불현저(P>0.05).상대이언,중구배채용삼수4적량보융합법화CHX+CB격활5 h효과교호.
