CAJ | 학술논문

目的:观察和厚朴酚(HNK)对内毒素(LPS)诱导人肾小球系膜细胞(HRMCs)炎症反应的抑制作用及其分子机制研究.方法:以MTS法检测和厚朴酚(0～160μmol/L)对人肾小球系膜细胞的毒性作用,确定合适的药物实验浓度.将系膜细胞与LPS(1μg/ml)及不同浓度的和厚朴酚(0～20μmol/L)共同培养24h后收集培养上清液和细胞,并提取细胞蛋白.ELISA法检测各组培养上清液中IL-1β、TNF-α、IL-18及TGF-β1的表达水平,免疫印迹Western blot法检测细胞NF-κB p65, IKK-α/β及IKB-α磷酸化、非磷酸化蛋白表达水平,探讨和厚朴酚的抗炎作用机制.结果: 20μmol/L及以下的和厚朴酚浓度对系膜细胞无明显毒性作用,但40μmol/L及以上的浓度明显降低系膜细胞的增殖活力.LPS刺激可显著诱导系膜细胞炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-18及TGF-β1的产生.和厚朴酚(0～20μmol/L)剂量依赖性地抑制LPS诱导的炎症因子的表达.免疫印迹结果显示,和厚朴酚可显著抑制LPS诱导的系膜细胞NF-κB p65, IKK-α/β及IKB-α等信号分子蛋白磷酸化水平.结论:和厚朴酚能有效抑制LPS诱导的人肾小球系膜细胞炎性细胞因子的表达,其机制部分通过抑制细胞NF-κB p65、 IKK-α/β及IKB-α等信号分子的磷酸化水平.
목적:관찰화후박분(HNK)대내독소(LPS)유도인신소구계막세포(HRMCs)염증반응적억제작용급기분자궤제연구.방법:이MTS법검측화후박분(0～160μmol/L)대인신소구계막세포적독성작용,학정합괄적약물실험농도.장계막세포여LPS(1μg/ml)급불동농도적화후박분(0～20μmol/L)공동배양24h후수집배양상청액화세포,병제취세포단백.ELISA법검측각조배양상청액중IL-1β、TNF-α、IL-18급TGF-β1적표체수평,면역인적Western blot법검측세포NF-κB p65, IKK-α/β급IKB-α린산화、비린산화단백표체수평,탐토화후박분적항염작용궤제.결과: 20μmol/L급이하적화후박분농도대계막세포무명현독성작용,단40μmol/L급이상적농도명현강저계막세포적증식활력.LPS자격가현저유도계막세포염증인자IL-1β、TNF-α、IL-18급TGF-β1적산생.화후박분(0～20μmol/L)제량의뢰성지억제LPS유도적염증인자적표체.면역인적결과현시,화후박분가현저억제LPS유도적계막세포NF-κB p65, IKK-α/β급IKB-α등신호분자단백린산화수평.결론:화후박분능유효억제LPS유도적인신소구계막세포염성세포인자적표체,기궤제부분통과억제세포NF-κB p65、 IKK-α/β급IKB-α등신호분자적린산화수평.