蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2012年
2期
199-203
,共5页
木质部特异启动子%载体构建%转基因%绿色荧光蛋白
木質部特異啟動子%載體構建%轉基因%綠色熒光蛋白
목질부특이계동자%재체구건%전기인%록색형광단백
木质部纤维素合酶基因(CesA)在植物正常生长期的木质部特异表达,受到外界压力时可诱导在韧皮部表达,因而被用作杨树抗桑天牛转基因研究中的特异性表达启动子.将前期分离的CesA上游DNA片段JCesAP、YCesAP和MDCesAP分别替换植物表达载体pCAMBIA1302中的组成型启动子CaMV35S,构建成新的植物组织特异性表达载体pJCesAP-GFP、pYCesAP-GFP和pMDCesAP-GFP,然后采用农杆菌介导法转化烟草,均得到完整的再生烟草植株.经PCR初步检测证明目的基因已整合到烟草基因组中.荧光检测JCesAP、YCesAP和MDCesAP片段均能启动GFP蛋白的表达,在395 nm激发光下出现黄绿色荧光,显示3个GesA片段均具有在木质部特异表达的启动子活性.
木質部纖維素閤酶基因(CesA)在植物正常生長期的木質部特異錶達,受到外界壓力時可誘導在韌皮部錶達,因而被用作楊樹抗桑天牛轉基因研究中的特異性錶達啟動子.將前期分離的CesA上遊DNA片段JCesAP、YCesAP和MDCesAP分彆替換植物錶達載體pCAMBIA1302中的組成型啟動子CaMV35S,構建成新的植物組織特異性錶達載體pJCesAP-GFP、pYCesAP-GFP和pMDCesAP-GFP,然後採用農桿菌介導法轉化煙草,均得到完整的再生煙草植株.經PCR初步檢測證明目的基因已整閤到煙草基因組中.熒光檢測JCesAP、YCesAP和MDCesAP片段均能啟動GFP蛋白的錶達,在395 nm激髮光下齣現黃綠色熒光,顯示3箇GesA片段均具有在木質部特異錶達的啟動子活性.
목질부섬유소합매기인(CesA)재식물정상생장기적목질부특이표체,수도외계압력시가유도재인피부표체,인이피용작양수항상천우전기인연구중적특이성표체계동자.장전기분리적CesA상유DNA편단JCesAP、YCesAP화MDCesAP분별체환식물표체재체pCAMBIA1302중적조성형계동자CaMV35S,구건성신적식물조직특이성표체재체pJCesAP-GFP、pYCesAP-GFP화pMDCesAP-GFP,연후채용농간균개도법전화연초,균득도완정적재생연초식주.경PCR초보검측증명목적기인이정합도연초기인조중.형광검측JCesAP、YCesAP화MDCesAP편단균능계동GFP단백적표체,재395 nm격발광하출현황록색형광,현시3개GesA편단균구유재목질부특이표체적계동자활성.
