中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2003年
4期
362-366
,共5页
对虾白斑综合征病毒(WSSV)%基因表达%细胞因子受体
對蝦白斑綜閤徵病毒(WSSV)%基因錶達%細胞因子受體
대하백반종합정병독(WSSV)%기인표체%세포인자수체
在对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)的基因组中发现一个具有细胞因子受体特征的开放阅读框,该阅读框全长2022个核苷酸,编码674个氨基酸,蛋白质理论分子量为76kDa.该基因含有真核生物细胞因子gpl30受体特征序列.为了研究该基因的功能,采用PCR方法从病毒基因组中扩增出基因片段,克隆到pGEM-T Easy载体中,经BamH I和Sal I双酶切后插入pET28b表达载体中.重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,IPTG诱导后,经SDS-PAGE电泳表明在76kDa处有目的蛋白表达.用冰浴超声波对诱导后的菌液进行处理以获得初步纯化的蛋白,作为抗原人工免疫实验兔子以获得含特异性抗体的抗血清.该基因的表达成功,为其功能的进一步深入研究奠定了基础.
在對蝦白斑綜閤徵病毒(White spot syndrome virus,WSSV)的基因組中髮現一箇具有細胞因子受體特徵的開放閱讀框,該閱讀框全長2022箇覈苷痠,編碼674箇氨基痠,蛋白質理論分子量為76kDa.該基因含有真覈生物細胞因子gpl30受體特徵序列.為瞭研究該基因的功能,採用PCR方法從病毒基因組中擴增齣基因片段,剋隆到pGEM-T Easy載體中,經BamH I和Sal I雙酶切後插入pET28b錶達載體中.重組質粒轉化到大腸桿菌BL21中,IPTG誘導後,經SDS-PAGE電泳錶明在76kDa處有目的蛋白錶達.用冰浴超聲波對誘導後的菌液進行處理以穫得初步純化的蛋白,作為抗原人工免疫實驗兔子以穫得含特異性抗體的抗血清.該基因的錶達成功,為其功能的進一步深入研究奠定瞭基礎.
재대하백반종합정병독(White spot syndrome virus,WSSV)적기인조중발현일개구유세포인자수체특정적개방열독광,해열독광전장2022개핵감산,편마674개안기산,단백질이론분자량위76kDa.해기인함유진핵생물세포인자gpl30수체특정서렬.위료연구해기인적공능,채용PCR방법종병독기인조중확증출기인편단,극륭도pGEM-T Easy재체중,경BamH I화Sal I쌍매절후삽입pET28b표체재체중.중조질립전화도대장간균BL21중,IPTG유도후,경SDS-PAGE전영표명재76kDa처유목적단백표체.용빙욕초성파대유도후적균액진행처리이획득초보순화적단백,작위항원인공면역실험토자이획득함특이성항체적항혈청.해기인적표체성공,위기공능적진일보심입연구전정료기출.
