生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2006年
3期
370-373
,共4页
谭亚芳%杜宗敏%何晓晓%翟俊辉%郭兆彪%王津%杨瑞馥
譚亞芳%杜宗敏%何曉曉%翟俊輝%郭兆彪%王津%楊瑞馥
담아방%두종민%하효효%적준휘%곽조표%왕진%양서복
鼠疫耶尔森氏菌%肽核酸%磁珠%荧光扫描技术
鼠疫耶爾森氏菌%肽覈痠%磁珠%熒光掃描技術
서역야이삼씨균%태핵산%자주%형광소묘기술
目的:利用特异的肽核酸(PNA)探针、链霉亲和素包被的磁珠和cy5纳米颗粒,通过荧光扫描技术,建立一种特异、快速、准确地检测鼠疫耶尔森氏菌的方法.方法:针对鼠疫耶尔森氏菌pMT1质粒上的caf1基因设计并合成一对特异PNA探针,经生物素标记后,分别与链霉亲和素包被的磁珠和cy5纳米颗粒结合;将探针与待测鼠疫耶尔森氏菌的基因组DNA杂交后,利用荧光扫描技术进行检测.探讨了多个实验因素对测定的影响,并进行了特异性和灵敏度检测.结果:建立并优化了利用PNA探针检测鼠疫耶尔森氏菌的方法,得到较好的线性关系;检测的灵敏度为0.9μg/mL(待测DNA).结论:PNA探针与靶基因的结合不易受杂交液离子强度的影响,结合后具有较高的稳定性.本研究建立的分析方法能够灵敏、特异、稳定地对鼠疫耶尔森氏菌进行定量检测,为鼠疫的监控、诊断提供了有力手段.
目的:利用特異的肽覈痠(PNA)探針、鏈黴親和素包被的磁珠和cy5納米顆粒,通過熒光掃描技術,建立一種特異、快速、準確地檢測鼠疫耶爾森氏菌的方法.方法:針對鼠疫耶爾森氏菌pMT1質粒上的caf1基因設計併閤成一對特異PNA探針,經生物素標記後,分彆與鏈黴親和素包被的磁珠和cy5納米顆粒結閤;將探針與待測鼠疫耶爾森氏菌的基因組DNA雜交後,利用熒光掃描技術進行檢測.探討瞭多箇實驗因素對測定的影響,併進行瞭特異性和靈敏度檢測.結果:建立併優化瞭利用PNA探針檢測鼠疫耶爾森氏菌的方法,得到較好的線性關繫;檢測的靈敏度為0.9μg/mL(待測DNA).結論:PNA探針與靶基因的結閤不易受雜交液離子彊度的影響,結閤後具有較高的穩定性.本研究建立的分析方法能夠靈敏、特異、穩定地對鼠疫耶爾森氏菌進行定量檢測,為鼠疫的鑑控、診斷提供瞭有力手段.
목적:이용특이적태핵산(PNA)탐침、련매친화소포피적자주화cy5납미과립,통과형광소묘기술,건립일충특이、쾌속、준학지검측서역야이삼씨균적방법.방법:침대서역야이삼씨균pMT1질립상적caf1기인설계병합성일대특이PNA탐침,경생물소표기후,분별여련매친화소포피적자주화cy5납미과립결합;장탐침여대측서역야이삼씨균적기인조DNA잡교후,이용형광소묘기술진행검측.탐토료다개실험인소대측정적영향,병진행료특이성화령민도검측.결과:건립병우화료이용PNA탐침검측서역야이삼씨균적방법,득도교호적선성관계;검측적령민도위0.9μg/mL(대측DNA).결론:PNA탐침여파기인적결합불역수잡교액리자강도적영향,결합후구유교고적은정성.본연구건립적분석방법능구령민、특이、은정지대서역야이삼씨균진행정량검측,위서역적감공、진단제공료유력수단.
