治疗用质粒DNA的纯化工艺
치료용질립DNA적순화공예
A Purification Procedure for Therapeutic Plasmid DNA
  • 万方数据
    中国生物制品学杂志 중국생물제품학잡지
    CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
    2008年 10期 899-902 ,共4页

    丛艳昭%鲁承%金宁一%申镇维%梁晓枫%金洪涛%白靓%牟伟锋%于长勇%常巧呈%齐楷%金明杰

    총염소%로승%금저일%신진유%량효풍%금홍도%백정%모위봉%우장용%상교정%제해%금명걸

    质粒DNA%纯化%中空纤维柱%层析 質粒DNA%純化%中空纖維柱%層析
    질립DNA%순화%중공섬유주%층석
    目的 探索适合大规模生产治疗用质粒DNA的纯化工艺.方法 采用中空纤维柱收菌、碱裂解,再应用中空纤维柱浓缩质粒,经分子筛、亲和、离子交换等层析分离纯化质粒DNA,并应用凝胶电泳、PCR、核酸蛋白检测仪、BCA蛋白检测试剂盒和内毒素检测试剂盒对所纯化的质粒DNA进行全面检定.结果 所获得的超螺旋质粒DNA达到样品总质粒的91.2%;质粒DNA总纯度为1.8;内毒素含量小于10 EU/mg;几乎检测不到蛋白质残留,未检出基因组DNA残留.各项指标均符合有关质量标准.结论所采用的纯化工艺省时省力,制备的质粒DNA纯度高,适用于大规模生产治疗用质粒DNA.
    목적 탐색괄합대규모생산치료용질립DNA적순화공예.방법 채용중공섬유주수균、감렬해,재응용중공섬유주농축질립,경분자사、친화、리자교환등층석분리순화질립DNA,병응용응효전영、PCR、핵산단백검측의、BCA단백검측시제합화내독소검측시제합대소순화적질립DNA진행전면검정.결과 소획득적초라선질립DNA체도양품총질립적91.2%;질립DNA총순도위1.8;내독소함량소우10 EU/mg;궤호검측불도단백질잔류,미검출기인조DNA잔류.각항지표균부합유관질량표준.결론소채용적순화공예성시성력,제비적질립DNA순도고,괄용우대규모생산치료용질립DNA.
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