CAJ | 학술논문

本研究利用已建立的间接免疫组化方法检测鸭瘟病毒(DPV)gC基因疫苗(pcDNA-DPV-gC)免疫雏鸭后其表达蛋白在雏鸭体内的表达时相和分布规律,为DPV gC基因疫苗的进一步研究和应用提供基础数据.将不同剂量(50、100和200 μg)DPV gC基因疫苗免疫3周龄天府肉鸭,于免疫后不同时间点(4 h、12 h、1 d、3 d、5 d、7d、2周、4周、6周和10周)分别随机宰杀2只雏鸭,采集肝、脾、肺、肾、胰、脑、胸腺、哈氏腺、法氏囊、十二指肠、盲肠、直肠以及注射部位肌肉,应用间接免疫组化方法检测pcDNA-DPV-gC在雏鸭体内的表达时相和分布规律.结果显示:①各剂量免疫组第1天在肝、十二指肠、盲肠、直肠和注射部位肌肉检测到DPV gC蛋白,其中注射部位肌肉的阳性信号最强;第2周时各组织中的抗原表达量达到高峰,随着时间推移,阳性信号以不同速度逐渐衰减;第10周时各剂量免疫组仍在肝、脑、十二指肠、盲肠和直肠发现持续表达DPV gC蛋白;而胰在所有时间点均未检出阳性信号;②pcDNA-DPV-gC在不同组织的表达量也存在差异,肝、脾、法氏囊、脑、十二指肠、盲肠和直肠是DPV gC蛋白主要的分布器官;阳性信号主要出现在肠黏膜固有层细胞、脾白髓或红髓区的淋巴细胞以及脑皮质神经胶质细胞等部位;③根据各组织的阳性信号强度和持续时间的情况,得到pcDNA-DPV-gC在雏鸭各组织的总体表达规律:十二指肠、盲肠、直肠＞肝脏＞法氏囊＞脾＞脑＞注射部位肌肉＞胸腺＞肺＞哈氏腺＞肾脏＞胰脏;④不同剂量pcDNA-DPV-gC免疫锥鸭后各组织中抗原表达量和持续时间的总体规律依次为200 μg组＞100 μg组＞50μg组.结果表明不同剂量pcDNA-DPV-gC免疫后1 d即可在雏鸭体内发现阳性信号,持续存在10周仍可检测到DPV gC蛋白,预示pcDNA-DPV-gC免疫期可持续较长时间.
본연구이용이건립적간접면역조화방법검측압온병독(DPV)gC기인역묘(pcDNA-DPV-gC)면역추압후기표체단백재추압체내적표체시상화분포규률,위DPV gC기인역묘적진일보연구화응용제공기출수거.장불동제량(50、100화200 μg)DPV gC기인역묘면역3주령천부육압,우면역후불동시간점(4 h、12 h、1 d、3 d、5 d、7d、2주、4주、6주화10주)분별수궤재살2지추압,채집간、비、폐、신、이、뇌、흉선、합씨선、법씨낭、십이지장、맹장、직장이급주사부위기육,응용간접면역조화방법검측pcDNA-DPV-gC재추압체내적표체시상화분포규률.결과현시:①각제량면역조제1천재간、십이지장、맹장、직장화주사부위기육검측도DPV gC단백,기중주사부위기육적양성신호최강;제2주시각조직중적항원표체량체도고봉,수착시간추이,양성신호이불동속도축점쇠감;제10주시각제량면역조잉재간、뇌、십이지장、맹장화직장발현지속표체DPV gC단백;이이재소유시간점균미검출양성신호;②pcDNA-DPV-gC재불동조직적표체량야존재차이,간、비、법씨낭、뇌、십이지장、맹장화직장시DPV gC단백주요적분포기관;양성신호주요출현재장점막고유층세포、비백수혹홍수구적림파세포이급뇌피질신경효질세포등부위;③근거각조직적양성신호강도화지속시간적정황,득도pcDNA-DPV-gC재추압각조직적총체표체규률:십이지장、맹장、직장＞간장＞법씨낭＞비＞뇌＞주사부위기육＞흉선＞폐＞합씨선＞신장＞이장;④불동제량pcDNA-DPV-gC면역추압후각조직중항원표체량화지속시간적총체규률의차위200 μg조＞100 μg조＞50μg조.결과표명불동제량pcDNA-DPV-gC면역후1 d즉가재추압체내발현양성신호,지속존재10주잉가검측도DPV gC단백,예시pcDNA-DPV-gC면역기가지속교장시간.