中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2010年
4期
433-437
,共5页
杨波%刘辉%张丽娅%李瑾昱%白莉%孙胜杰%焦顺昌
楊波%劉輝%張麗婭%李瑾昱%白莉%孫勝傑%焦順昌
양파%류휘%장려아%리근욱%백리%손성걸%초순창
转化生长因子%自然杀伤细胞%结直肠癌
轉化生長因子%自然殺傷細胞%結直腸癌
전화생장인자%자연살상세포%결직장암
目的 将pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒转染原代NK细胞阻断其转化生长因子-β(TGF-β)信号,观察对人结肠癌细胞株HT-29的体外杀伤能力.方法 将HT-29细胞与TGF-β1共孵育,使其终浓度为10ng/ml,采用Amaxa Nucleofector技术分别将pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒和pIRES2-AcGFP空质粒转染原代NK细胞,活细胞计数试剂盒-8法检测二者对HT-29的体外杀伤活性.结果 pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒和绿色荧光蛋白空质粒的转染效率分别为18.85%和35.28%;Western blotting、RT-PCR证实DNTβRⅡ在NK细胞表达;与TGF-β1共孵育后,原代NK细胞的杀伤活性减弱(效靶比10∶ 1时 14.40%±2.00%比26.14%±2.50%,P＜0.05;效靶比20∶ 1时19.18%±2.49% 比 40.81%±3.50%,P＜0.05);pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒转染组NK细胞的杀伤活性高于绿色荧光蛋白对照质粒转染组(效靶比10∶ 1时21.17%±2.49% 比11.48%±1.11%,P＜0.05;效靶比20∶ 1时35.30%±3.78% 比17.19%±2.29%,P＜0.05).结论 pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒转染原代NK细胞提高了NK细胞的体外抗肿瘤活性,为NK细胞过继性免疫治疗提供了新的方法.
目的 將pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ質粒轉染原代NK細胞阻斷其轉化生長因子-β(TGF-β)信號,觀察對人結腸癌細胞株HT-29的體外殺傷能力.方法 將HT-29細胞與TGF-β1共孵育,使其終濃度為10ng/ml,採用Amaxa Nucleofector技術分彆將pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ質粒和pIRES2-AcGFP空質粒轉染原代NK細胞,活細胞計數試劑盒-8法檢測二者對HT-29的體外殺傷活性.結果 pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ質粒和綠色熒光蛋白空質粒的轉染效率分彆為18.85%和35.28%;Western blotting、RT-PCR證實DNTβRⅡ在NK細胞錶達;與TGF-β1共孵育後,原代NK細胞的殺傷活性減弱(效靶比10∶ 1時 14.40%±2.00%比26.14%±2.50%,P＜0.05;效靶比20∶ 1時19.18%±2.49% 比 40.81%±3.50%,P＜0.05);pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ質粒轉染組NK細胞的殺傷活性高于綠色熒光蛋白對照質粒轉染組(效靶比10∶ 1時21.17%±2.49% 比11.48%±1.11%,P＜0.05;效靶比20∶ 1時35.30%±3.78% 比17.19%±2.29%,P＜0.05).結論 pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ質粒轉染原代NK細胞提高瞭NK細胞的體外抗腫瘤活性,為NK細胞過繼性免疫治療提供瞭新的方法.
목적 장pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ질립전염원대NK세포조단기전화생장인자-β(TGF-β)신호,관찰대인결장암세포주HT-29적체외살상능력.방법 장HT-29세포여TGF-β1공부육,사기종농도위10ng/ml,채용Amaxa Nucleofector기술분별장pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ질립화pIRES2-AcGFP공질립전염원대NK세포,활세포계수시제합-8법검측이자대HT-29적체외살상활성.결과 pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ질립화록색형광단백공질립적전염효솔분별위18.85%화35.28%;Western blotting、RT-PCR증실DNTβRⅡ재NK세포표체;여TGF-β1공부육후,원대NK세포적살상활성감약(효파비10∶ 1시 14.40%±2.00%비26.14%±2.50%,P＜0.05;효파비20∶ 1시19.18%±2.49% 비 40.81%±3.50%,P＜0.05);pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ질립전염조NK세포적살상활성고우록색형광단백대조질립전염조(효파비10∶ 1시21.17%±2.49% 비11.48%±1.11%,P＜0.05;효파비20∶ 1시35.30%±3.78% 비17.19%±2.29%,P＜0.05).결론 pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ질립전염원대NK세포제고료NK세포적체외항종류활성,위NK세포과계성면역치료제공료신적방법.
