中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
10期
1755-1758
,共4页
路君%陈宗峰%黄粱浒%谭建明
路君%陳宗峰%黃粱滸%譚建明
로군%진종봉%황량호%담건명
人胚胎干细胞%基因转染%表达效率%启动子%增强型绿色荧光蛋白
人胚胎榦細胞%基因轉染%錶達效率%啟動子%增彊型綠色熒光蛋白
인배태간세포%기인전염%표체효솔%계동자%증강형록색형광단백
背景:人类胚胎干细胞的修饰和操作技术多种多样,它们在效率、可靠性及安全性方面各有不同.目的:对比观察两种化学转染试剂转染含不同启动子的增强型绿色荧光蛋白表达载体在人胚胎干细胞中的表达效率.方法:采用Fugene HD和lipofectamine2000分别转染无滋养层培养的H9细胞,荧光显微镜下观察阳性克隆,流式细胞术分析不同载体pCAG-EGFP、pEGFP-N3在H9细胞中的表达效率.结果与结论:Fugene HD转染的pCAG-EGFP、pEGFP-N3两种载体在H9细胞中的表达效率分别为(42.45±3.32)%、(25.95±1.91)%,差异有显著性意义(P < 0.05).lipofectamine2000转染的pCAG-EGFP、pEGFP-N3两种载体在H9细胞中的表达效率分别为(1.94±0.18)%、(1.49±0.33)%.采用Fugene HD转染的表达效率均高于lipofectamine2000转染的表达效率(P < 0.05).结果显示在人胚胎干细胞的H9细胞系中,Fugene HD的转染效率显著高于lipofectamine2000;CAG启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白表达效率显著高于CMV启动子.
揹景:人類胚胎榦細胞的脩飾和操作技術多種多樣,它們在效率、可靠性及安全性方麵各有不同.目的:對比觀察兩種化學轉染試劑轉染含不同啟動子的增彊型綠色熒光蛋白錶達載體在人胚胎榦細胞中的錶達效率.方法:採用Fugene HD和lipofectamine2000分彆轉染無滋養層培養的H9細胞,熒光顯微鏡下觀察暘性剋隆,流式細胞術分析不同載體pCAG-EGFP、pEGFP-N3在H9細胞中的錶達效率.結果與結論:Fugene HD轉染的pCAG-EGFP、pEGFP-N3兩種載體在H9細胞中的錶達效率分彆為(42.45±3.32)%、(25.95±1.91)%,差異有顯著性意義(P < 0.05).lipofectamine2000轉染的pCAG-EGFP、pEGFP-N3兩種載體在H9細胞中的錶達效率分彆為(1.94±0.18)%、(1.49±0.33)%.採用Fugene HD轉染的錶達效率均高于lipofectamine2000轉染的錶達效率(P < 0.05).結果顯示在人胚胎榦細胞的H9細胞繫中,Fugene HD的轉染效率顯著高于lipofectamine2000;CAG啟動子驅動的增彊型綠色熒光蛋白錶達效率顯著高于CMV啟動子.
배경:인류배태간세포적수식화조작기술다충다양,타문재효솔、가고성급안전성방면각유불동.목적:대비관찰량충화학전염시제전염함불동계동자적증강형록색형광단백표체재체재인배태간세포중적표체효솔.방법:채용Fugene HD화lipofectamine2000분별전염무자양층배양적H9세포,형광현미경하관찰양성극륭,류식세포술분석불동재체pCAG-EGFP、pEGFP-N3재H9세포중적표체효솔.결과여결론:Fugene HD전염적pCAG-EGFP、pEGFP-N3량충재체재H9세포중적표체효솔분별위(42.45±3.32)%、(25.95±1.91)%,차이유현저성의의(P < 0.05).lipofectamine2000전염적pCAG-EGFP、pEGFP-N3량충재체재H9세포중적표체효솔분별위(1.94±0.18)%、(1.49±0.33)%.채용Fugene HD전염적표체효솔균고우lipofectamine2000전염적표체효솔(P < 0.05).결과현시재인배태간세포적H9세포계중,Fugene HD적전염효솔현저고우lipofectamine2000;CAG계동자구동적증강형록색형광단백표체효솔현저고우CMV계동자.
