泰山医学院学报
泰山醫學院學報
태산의학원학보
JOURNAL OF TAISHAN MEDICAL COLLEGE
2011年
4期
260-263
,共4页
免疫磁珠分选%CD4+CD25+%T细胞%免疫抑制%脐血
免疫磁珠分選%CD4+CD25+%T細胞%免疫抑製%臍血
면역자주분선%CD4+CD25+%T세포%면역억제%제혈
目的 分离成人外周血、脐血CD4+CD25+ 调节性T细胞,并检测其功能,以了解脐血CD4+CD25+T细胞的特性.方法 应用免疫磁珠分选法从健康成人外周血、脐血淋巴细胞中分离纯化CD4+CD25+ 、CD4+CD25-T细胞.应用流式细胞术检测分离纯度,胎盘蓝染色检测细胞存活率;RT-PCR技术检测CD4+CD25+、CD4+CD25-T细胞中Foxp3的mRNA的表达;体外增殖实验检测其对CD4+CD25-T细胞的免疫抑制作用.结果 MACS分离的CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25-T细胞纯度达(92.7±1.6)%、(90.3±1.2)%,细胞存活率达(95.3±2.1)%;体外经抗CD3、CD28单克隆抗体刺激培养的脐血及成人外周血CD4+CD25+T细胞同时得到扩增,而且高表达Foxp3;CD4+CD25+ T细胞能有效的抑制效应T细胞的增殖,当效靶比为1︰1时,其抑制效应T细胞的作用最强,成人外周血抑制率为(81.36±1.61)%、脐血抑制率为(90.74±2.43)%.结论 脐血和成人外周血CD4+CD25+T细胞是一群具有免疫抑制功能的调节性T细胞,与成人外周血相比,培养后的脐血CD4+CD25+T细胞比成人外周血有更强的免疫抑制功能.
目的 分離成人外週血、臍血CD4+CD25+ 調節性T細胞,併檢測其功能,以瞭解臍血CD4+CD25+T細胞的特性.方法 應用免疫磁珠分選法從健康成人外週血、臍血淋巴細胞中分離純化CD4+CD25+ 、CD4+CD25-T細胞.應用流式細胞術檢測分離純度,胎盤藍染色檢測細胞存活率;RT-PCR技術檢測CD4+CD25+、CD4+CD25-T細胞中Foxp3的mRNA的錶達;體外增殖實驗檢測其對CD4+CD25-T細胞的免疫抑製作用.結果 MACS分離的CD4+CD25+T細胞、CD4+CD25-T細胞純度達(92.7±1.6)%、(90.3±1.2)%,細胞存活率達(95.3±2.1)%;體外經抗CD3、CD28單剋隆抗體刺激培養的臍血及成人外週血CD4+CD25+T細胞同時得到擴增,而且高錶達Foxp3;CD4+CD25+ T細胞能有效的抑製效應T細胞的增殖,噹效靶比為1︰1時,其抑製效應T細胞的作用最彊,成人外週血抑製率為(81.36±1.61)%、臍血抑製率為(90.74±2.43)%.結論 臍血和成人外週血CD4+CD25+T細胞是一群具有免疫抑製功能的調節性T細胞,與成人外週血相比,培養後的臍血CD4+CD25+T細胞比成人外週血有更彊的免疫抑製功能.
목적 분리성인외주혈、제혈CD4+CD25+ 조절성T세포,병검측기공능,이료해제혈CD4+CD25+T세포적특성.방법 응용면역자주분선법종건강성인외주혈、제혈림파세포중분리순화CD4+CD25+ 、CD4+CD25-T세포.응용류식세포술검측분리순도,태반람염색검측세포존활솔;RT-PCR기술검측CD4+CD25+、CD4+CD25-T세포중Foxp3적mRNA적표체;체외증식실험검측기대CD4+CD25-T세포적면역억제작용.결과 MACS분리적CD4+CD25+T세포、CD4+CD25-T세포순도체(92.7±1.6)%、(90.3±1.2)%,세포존활솔체(95.3±2.1)%;체외경항CD3、CD28단극륭항체자격배양적제혈급성인외주혈CD4+CD25+T세포동시득도확증,이차고표체Foxp3;CD4+CD25+ T세포능유효적억제효응T세포적증식,당효파비위1︰1시,기억제효응T세포적작용최강,성인외주혈억제솔위(81.36±1.61)%、제혈억제솔위(90.74±2.43)%.결론 제혈화성인외주혈CD4+CD25+T세포시일군구유면역억제공능적조절성T세포,여성인외주혈상비,배양후적제혈CD4+CD25+T세포비성인외주혈유경강적면역억제공능.
