湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
2011年
15期
3116-3119
,共4页
郝宝成%梁剑平%兰喜%刑小勇%项海涛%温峰琴%胡永浩%柳纪省
郝寶成%樑劍平%蘭喜%刑小勇%項海濤%溫峰琴%鬍永浩%柳紀省
학보성%량검평%란희%형소용%항해도%온봉금%호영호%류기성
猪戊型肝炎病毒%衣壳蛋白%CP239片段%原核表达
豬戊型肝炎病毒%衣殼蛋白%CP239片段%原覈錶達
저무형간염병독%의각단백%CP239편단%원핵표체
为了提高猪戊型肝炎病毒swCH 189株衣壳蛋白基因CP239片段在大肠杆菌中的表达量,研究了载体、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对衣壳蛋白基因CP239片段融合蛋白表达量的影响.结果表明,用LB培养基于37℃培养3.5 h后,采用终浓度为0.3 mmol/L的IPTG在37℃、200r/min诱导培养4h,pET32a-CP239融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-CP239融合蛋白的分子质量与预期大小一致,约为45.3 ku;Western blotting结果表明,pET32a-CP239融合蛋白可以与抗-HEV阳性血清发生特异性反应,并具有良好的反应原性,说明衣壳蛋白基因CP239片段蛋白得到正确表达.
為瞭提高豬戊型肝炎病毒swCH 189株衣殼蛋白基因CP239片段在大腸桿菌中的錶達量,研究瞭載體、溫度、轉速、誘導時間以及誘導劑IPTG濃度等不同條件對衣殼蛋白基因CP239片段融閤蛋白錶達量的影響.結果錶明,用LB培養基于37℃培養3.5 h後,採用終濃度為0.3 mmol/L的IPTG在37℃、200r/min誘導培養4h,pET32a-CP239融閤蛋白錶達量最大;SDS-PAGE檢測結果錶明pET32a-CP239融閤蛋白的分子質量與預期大小一緻,約為45.3 ku;Western blotting結果錶明,pET32a-CP239融閤蛋白可以與抗-HEV暘性血清髮生特異性反應,併具有良好的反應原性,說明衣殼蛋白基因CP239片段蛋白得到正確錶達.
위료제고저무형간염병독swCH 189주의각단백기인CP239편단재대장간균중적표체량,연구료재체、온도、전속、유도시간이급유도제IPTG농도등불동조건대의각단백기인CP239편단융합단백표체량적영향.결과표명,용LB배양기우37℃배양3.5 h후,채용종농도위0.3 mmol/L적IPTG재37℃、200r/min유도배양4h,pET32a-CP239융합단백표체량최대;SDS-PAGE검측결과표명pET32a-CP239융합단백적분자질량여예기대소일치,약위45.3 ku;Western blotting결과표명,pET32a-CP239융합단백가이여항-HEV양성혈청발생특이성반응,병구유량호적반응원성,설명의각단백기인CP239편단단백득도정학표체.
