江西农业大学学报
江西農業大學學報
강서농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS
2011年
6期
1219-1227
,共9页
杨彩云%杜慈%黄平%温真%毛惠民%杨梅
楊綵雲%杜慈%黃平%溫真%毛惠民%楊梅
양채운%두자%황평%온진%모혜민%양매
AiiA蛋白%补料分批发酵%条件优化
AiiA蛋白%補料分批髮酵%條件優化
AiiA단백%보료분비발효%조건우화
通过摇瓶培养确定重组工程菌E.coli BL21( DE3) -pET29a-aiiA表达AiiA蛋白可溶性表达的最优化条件,考察以牛肉膏蛋白胨为基础培养基添加不同种类的碳源、不同浓度的磷酸钾缓冲液(pH7.0)、微量元素、乙酸以及调整牛肉膏蛋白胨的比值对AiiA蛋白可溶性表达的影响,并用15 L发酵罐进行补料分批发酵,确定高密度发酵工艺条件.结果表明:优化发酵培养基为蔗糖10 g/L,牛肉膏7.8 g/L,蛋白胨31.2 g/L,NaCl 5 g/L,K2 HPO4·3H2O 14 g/L,KH2PO4 5.3 g/L,4 mL/L微量元素.优化后AiiA蛋白可溶性达4.31 mg/mL.在15 L发酵罐补料分批发酵培养中,诱导24 h时,发酵菌OD600达到18.5,可溶性蛋白表达量5.9 mg/mL,占AiiA总蛋白50.7％,实现了扩大培养.
通過搖瓶培養確定重組工程菌E.coli BL21( DE3) -pET29a-aiiA錶達AiiA蛋白可溶性錶達的最優化條件,攷察以牛肉膏蛋白胨為基礎培養基添加不同種類的碳源、不同濃度的燐痠鉀緩遲液(pH7.0)、微量元素、乙痠以及調整牛肉膏蛋白胨的比值對AiiA蛋白可溶性錶達的影響,併用15 L髮酵罐進行補料分批髮酵,確定高密度髮酵工藝條件.結果錶明:優化髮酵培養基為蔗糖10 g/L,牛肉膏7.8 g/L,蛋白胨31.2 g/L,NaCl 5 g/L,K2 HPO4·3H2O 14 g/L,KH2PO4 5.3 g/L,4 mL/L微量元素.優化後AiiA蛋白可溶性達4.31 mg/mL.在15 L髮酵罐補料分批髮酵培養中,誘導24 h時,髮酵菌OD600達到18.5,可溶性蛋白錶達量5.9 mg/mL,佔AiiA總蛋白50.7％,實現瞭擴大培養.
통과요병배양학정중조공정균E.coli BL21( DE3) -pET29a-aiiA표체AiiA단백가용성표체적최우화조건,고찰이우육고단백동위기출배양기첨가불동충류적탄원、불동농도적린산갑완충액(pH7.0)、미량원소、을산이급조정우육고단백동적비치대AiiA단백가용성표체적영향,병용15 L발효관진행보료분비발효,학정고밀도발효공예조건.결과표명:우화발효배양기위자당10 g/L,우육고7.8 g/L,단백동31.2 g/L,NaCl 5 g/L,K2 HPO4·3H2O 14 g/L,KH2PO4 5.3 g/L,4 mL/L미량원소.우화후AiiA단백가용성체4.31 mg/mL.재15 L발효관보료분비발효배양중,유도24 h시,발효균OD600체도18.5,가용성단백표체량5.9 mg/mL,점AiiA총단백50.7％,실현료확대배양.
