畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
4期
634-641
,共8页
黎观红%洪智敏%贾永杰%易中华%瞿明仁%刘思国
黎觀紅%洪智敏%賈永傑%易中華%瞿明仁%劉思國
려관홍%홍지민%가영걸%역중화%구명인%류사국
β-防御素-9%鸡小肠上皮细胞%鼠李糖乳酸杆菌LGA%荧光定量PCR
β-防禦素-9%鷄小腸上皮細胞%鼠李糖乳痠桿菌LGA%熒光定量PCR
β-방어소-9%계소장상피세포%서리당유산간균LGA%형광정량PCR
本研究旨在研究益生性鼠李糖乳酸杆菌LGA对体外培养的鸡小肠上皮细胞β-防御素-9 (AvBD9)表达的调节作用.选用鼠李糖乳酸杆菌LGA对体外培养的鸡小肠上皮细胞进行剂量依赖性及时间依赖性刺激实验,利用实时荧光定量PCR(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)从mRNA水平研究刺激后上皮细胞AvBD9基因表达水平的差异.结果表明,不同浓度(2×105、2×106、2×107 cfu· mL-1)鼠李糖乳酸杆菌LGA均能上调AvBD9mRNA的表达,且在不同细菌浓度之间AvBD9 mRNA的表达存在差异.热灭活鼠李糖乳杆菌LGA亦能上调AvBD9基因表达,且上调值显著高于活菌(P＜0.05).鼠李糖乳杆菌LGA刺激上皮细胞后AvBD9表达存在时间依赖关系,12 h时AvBD9的表达达到峰值.Western blot检测结果显示,鼠李糖乳杆菌LGA刺激后的上皮细胞培养上清中存在AvBD9蛋白表达,表明AvBD9蛋白可以分泌到细胞外而发挥其生物学功能.益生性鼠李糖乳酸杆菌LGA与鸡肠道上皮细胞的相互作用过程中,鼠李糖乳酸杆菌LGA能够促进上皮细胞抗菌肽β-防御素-9的表达.本研究结果提示益生性乳杆菌可能通过促进肠道上皮抗菌肽的表达而发挥其益生作用.
本研究旨在研究益生性鼠李糖乳痠桿菌LGA對體外培養的鷄小腸上皮細胞β-防禦素-9 (AvBD9)錶達的調節作用.選用鼠李糖乳痠桿菌LGA對體外培養的鷄小腸上皮細胞進行劑量依賴性及時間依賴性刺激實驗,利用實時熒光定量PCR(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)從mRNA水平研究刺激後上皮細胞AvBD9基因錶達水平的差異.結果錶明,不同濃度(2×105、2×106、2×107 cfu· mL-1)鼠李糖乳痠桿菌LGA均能上調AvBD9mRNA的錶達,且在不同細菌濃度之間AvBD9 mRNA的錶達存在差異.熱滅活鼠李糖乳桿菌LGA亦能上調AvBD9基因錶達,且上調值顯著高于活菌(P＜0.05).鼠李糖乳桿菌LGA刺激上皮細胞後AvBD9錶達存在時間依賴關繫,12 h時AvBD9的錶達達到峰值.Western blot檢測結果顯示,鼠李糖乳桿菌LGA刺激後的上皮細胞培養上清中存在AvBD9蛋白錶達,錶明AvBD9蛋白可以分泌到細胞外而髮揮其生物學功能.益生性鼠李糖乳痠桿菌LGA與鷄腸道上皮細胞的相互作用過程中,鼠李糖乳痠桿菌LGA能夠促進上皮細胞抗菌肽β-防禦素-9的錶達.本研究結果提示益生性乳桿菌可能通過促進腸道上皮抗菌肽的錶達而髮揮其益生作用.
본연구지재연구익생성서리당유산간균LGA대체외배양적계소장상피세포β-방어소-9 (AvBD9)표체적조절작용.선용서리당유산간균LGA대체외배양적계소장상피세포진행제량의뢰성급시간의뢰성자격실험,이용실시형광정량PCR(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)종mRNA수평연구자격후상피세포AvBD9기인표체수평적차이.결과표명,불동농도(2×105、2×106、2×107 cfu· mL-1)서리당유산간균LGA균능상조AvBD9mRNA적표체,차재불동세균농도지간AvBD9 mRNA적표체존재차이.열멸활서리당유간균LGA역능상조AvBD9기인표체,차상조치현저고우활균(P＜0.05).서리당유간균LGA자격상피세포후AvBD9표체존재시간의뢰관계,12 h시AvBD9적표체체도봉치.Western blot검측결과현시,서리당유간균LGA자격후적상피세포배양상청중존재AvBD9단백표체,표명AvBD9단백가이분비도세포외이발휘기생물학공능.익생성서리당유산간균LGA여계장도상피세포적상호작용과정중,서리당유산간균LGA능구촉진상피세포항균태β-방어소-9적표체.본연구결과제시익생성유간균가능통과촉진장도상피항균태적표체이발휘기익생작용.
