沈阳药科大学学报
瀋暘藥科大學學報
침양약과대학학보
JOURNAL OF SHENYANG PHARMACEUTICAL UNIVERSIT
2008年
2期
153-157
,共5页
戴薇薇%刘晓燕%马晓芸%张树卓%张景海%郑建全
戴薇薇%劉曉燕%馬曉蕓%張樹卓%張景海%鄭建全
대미미%류효연%마효예%장수탁%장경해%정건전
酸感受离子通道亚基2a%爪蟾卵母细胞%pH值%钙离子
痠感受離子通道亞基2a%爪蟾卵母細胞%pH值%鈣離子
산감수리자통도아기2a%조섬란모세포%pH치%개리자
目的 构建大鼠酸感受离子通道亚基2a(acid-sensing ion channel subunit 2a,ASIC2a)的表达质粒并研究其组成的同聚体离子通道的生物学特性.方法 使用分子生物学技术构建大鼠ASIC2a亚基表达质粒;通过体外转录技术,使编码ASIC2a亚基的cRNA在爪蟾卵母细胞内表达并在膜表面形成同聚体离子通道;使用双电极电压钳技术研究ASIC2a的生物学特性.结果 在注射ASIC2a亚基cRNA的爪蟾卵母细胞上,降低胞外液pH值可诱导出内向电流.H+诱发的ASIC2a内向电流具有稳态失活成分可被氨氯吡咪可逆性阻断,其pH50为5.12.提高胞外Ca2+浓度可降低H+诱发的电流幅度,其IC50为11.98 mmol·L-1.当细胞外液中无Na+时,H+基本上不能诱发出内向电流;当同时去除细胞外液中Na+和K+时,H+可诱发出外向电流.结论 成功构建ASIC2a表达质粒;ASIC2a除了对Na+通透外,对K+也有一定的通透性,胞外Ca2+抑制ASIC2a孔道的开放.
目的 構建大鼠痠感受離子通道亞基2a(acid-sensing ion channel subunit 2a,ASIC2a)的錶達質粒併研究其組成的同聚體離子通道的生物學特性.方法 使用分子生物學技術構建大鼠ASIC2a亞基錶達質粒;通過體外轉錄技術,使編碼ASIC2a亞基的cRNA在爪蟾卵母細胞內錶達併在膜錶麵形成同聚體離子通道;使用雙電極電壓鉗技術研究ASIC2a的生物學特性.結果 在註射ASIC2a亞基cRNA的爪蟾卵母細胞上,降低胞外液pH值可誘導齣內嚮電流.H+誘髮的ASIC2a內嚮電流具有穩態失活成分可被氨氯吡咪可逆性阻斷,其pH50為5.12.提高胞外Ca2+濃度可降低H+誘髮的電流幅度,其IC50為11.98 mmol·L-1.噹細胞外液中無Na+時,H+基本上不能誘髮齣內嚮電流;噹同時去除細胞外液中Na+和K+時,H+可誘髮齣外嚮電流.結論 成功構建ASIC2a錶達質粒;ASIC2a除瞭對Na+通透外,對K+也有一定的通透性,胞外Ca2+抑製ASIC2a孔道的開放.
목적 구건대서산감수리자통도아기2a(acid-sensing ion channel subunit 2a,ASIC2a)적표체질립병연구기조성적동취체리자통도적생물학특성.방법 사용분자생물학기술구건대서ASIC2a아기표체질립;통과체외전록기술,사편마ASIC2a아기적cRNA재조섬란모세포내표체병재막표면형성동취체리자통도;사용쌍전겁전압겸기술연구ASIC2a적생물학특성.결과 재주사ASIC2a아기cRNA적조섬란모세포상,강저포외액pH치가유도출내향전류.H+유발적ASIC2a내향전류구유은태실활성분가피안록필미가역성조단,기pH50위5.12.제고포외Ca2+농도가강저H+유발적전류폭도,기IC50위11.98 mmol·L-1.당세포외액중무Na+시,H+기본상불능유발출내향전류;당동시거제세포외액중Na+화K+시,H+가유발출외향전류.결론 성공구건ASIC2a표체질립;ASIC2a제료대Na+통투외,대K+야유일정적통투성,포외Ca2+억제ASIC2a공도적개방.
