生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2008年
2期
26-29
,共4页
王俊英%关东明%钞亚鹏%张蔚%钱世钧
王俊英%關東明%鈔亞鵬%張蔚%錢世鈞
왕준영%관동명%초아붕%장위%전세균
嗜碱性芽孢杆菌%环糊精葡糖基转移酶%酶学性质%转化
嗜堿性芽孢桿菌%環糊精葡糖基轉移酶%酶學性質%轉化
기감성아포간균%배호정포당기전이매%매학성질%전화
目的:通过对一种强碱性环糊精葡糖基转移酶的纯化、酶学性质和转化特性研究,探索改进和提高环糊精生产效率的工艺.方法:从一株碱性土壤来源的新型产环糊精葡糖基转移酶的嗜碱性芽孢杆菌,运用乙醇沉淀、DEAE-Sepharose和HiTrap-Q离子交换柱层析等蛋白质分离纯化技术对该酶进行了纯化,测定了其酶学性质,并对其转化特性进行了研究.结果:经过微生物发酵和三步纯化,获得表观电泳纯的酶蛋白,纯化倍数为51.4.收率约9.2%.该酶的最适反应温度为50℃.酶的最适作用pH约为10,并且在pH6～pH 12条件下均较稳定.用5%可溶淀粉作底物进行转化,转化率约40%.在转化过程中加入沉淀剂环己烷,产物中β-CD的比例从84%提高到95%.结论:该酶是迄今报道过的适宜pH最高的环糊精葡糖基转移酶,专一性转化生产β-CD的能力优良,具有工业化应用的潜力.
目的:通過對一種彊堿性環糊精葡糖基轉移酶的純化、酶學性質和轉化特性研究,探索改進和提高環糊精生產效率的工藝.方法:從一株堿性土壤來源的新型產環糊精葡糖基轉移酶的嗜堿性芽孢桿菌,運用乙醇沉澱、DEAE-Sepharose和HiTrap-Q離子交換柱層析等蛋白質分離純化技術對該酶進行瞭純化,測定瞭其酶學性質,併對其轉化特性進行瞭研究.結果:經過微生物髮酵和三步純化,穫得錶觀電泳純的酶蛋白,純化倍數為51.4.收率約9.2%.該酶的最適反應溫度為50℃.酶的最適作用pH約為10,併且在pH6～pH 12條件下均較穩定.用5%可溶澱粉作底物進行轉化,轉化率約40%.在轉化過程中加入沉澱劑環己烷,產物中β-CD的比例從84%提高到95%.結論:該酶是迄今報道過的適宜pH最高的環糊精葡糖基轉移酶,專一性轉化生產β-CD的能力優良,具有工業化應用的潛力.
목적:통과대일충강감성배호정포당기전이매적순화、매학성질화전화특성연구,탐색개진화제고배호정생산효솔적공예.방법:종일주감성토양래원적신형산배호정포당기전이매적기감성아포간균,운용을순침정、DEAE-Sepharose화HiTrap-Q리자교환주층석등단백질분리순화기술대해매진행료순화,측정료기매학성질,병대기전화특성진행료연구.결과:경과미생물발효화삼보순화,획득표관전영순적매단백,순화배수위51.4.수솔약9.2%.해매적최괄반응온도위50℃.매적최괄작용pH약위10,병차재pH6～pH 12조건하균교은정.용5%가용정분작저물진행전화,전화솔약40%.재전화과정중가입침정제배기완,산물중β-CD적비례종84%제고도95%.결론:해매시흘금보도과적괄의pH최고적배호정포당기전이매,전일성전화생산β-CD적능력우량,구유공업화응용적잠력.
