西北林学院学报
西北林學院學報
서북림학원학보
JOURNAL OF NORTHWEST FORESTRY UNIVERSITY
2009年
2期
55-59
,共5页
任耀忠%张文辉%刘莉丽%李周岐%周建云%张存旭
任耀忠%張文輝%劉莉麗%李週岐%週建雲%張存旭
임요충%장문휘%류리려%리주기%주건운%장존욱
栓皮栎%RAPD%体系优化
栓皮櫟%RAPD%體繫優化
전피력%RAPD%체계우화
通过单因素2循环试验对栓皮栎RAPD反应条件进行系统优化,探讨了RAPD各反应条件间的交互作用,建立了栓皮栎RAPD的最佳反应体系和扩增程序.结果表明:(1)各反应因素对栓皮栎RAPD扩增具有不同影响,各因素间的交互作用明显,单因素多循环试验设计能够有效的减少其交互作用、优化出RAPD扩增的最佳反应体系和程序;(2)适合栓皮栎RAPD反应的体系总体积为20 μL,模板DNA用量30 ng,Taq DNA聚合酶用量1.75U,引物用量8 pmol,Mg2+浓度2.0 mmol·L-1,dNTPs浓度0.25 mmol·L-1,10×Buffer 2 μL;适合栓皮栎RAPD扩增的程序是94℃预变性4 min,94℃变性40 S,40℃退火30 s,72℃延伸2 min,40个循环,72℃延伸10 min.
通過單因素2循環試驗對栓皮櫟RAPD反應條件進行繫統優化,探討瞭RAPD各反應條件間的交互作用,建立瞭栓皮櫟RAPD的最佳反應體繫和擴增程序.結果錶明:(1)各反應因素對栓皮櫟RAPD擴增具有不同影響,各因素間的交互作用明顯,單因素多循環試驗設計能夠有效的減少其交互作用、優化齣RAPD擴增的最佳反應體繫和程序;(2)適閤栓皮櫟RAPD反應的體繫總體積為20 μL,模闆DNA用量30 ng,Taq DNA聚閤酶用量1.75U,引物用量8 pmol,Mg2+濃度2.0 mmol·L-1,dNTPs濃度0.25 mmol·L-1,10×Buffer 2 μL;適閤栓皮櫟RAPD擴增的程序是94℃預變性4 min,94℃變性40 S,40℃退火30 s,72℃延伸2 min,40箇循環,72℃延伸10 min.
통과단인소2순배시험대전피력RAPD반응조건진행계통우화,탐토료RAPD각반응조건간적교호작용,건립료전피력RAPD적최가반응체계화확증정서.결과표명:(1)각반응인소대전피력RAPD확증구유불동영향,각인소간적교호작용명현,단인소다순배시험설계능구유효적감소기교호작용、우화출RAPD확증적최가반응체계화정서;(2)괄합전피력RAPD반응적체계총체적위20 μL,모판DNA용량30 ng,Taq DNA취합매용량1.75U,인물용량8 pmol,Mg2+농도2.0 mmol·L-1,dNTPs농도0.25 mmol·L-1,10×Buffer 2 μL;괄합전피력RAPD확증적정서시94℃예변성4 min,94℃변성40 S,40℃퇴화30 s,72℃연신2 min,40개순배,72℃연신10 min.
