中国脊柱脊髓杂志
中國脊柱脊髓雜誌
중국척주척수잡지
CHINESE JOURNAL OF SPINE AND SPINAL CORD
2010年
11期
918-925
,共8页
王颖%冯世庆%赵鹏%焦新旭%魏志坚%韩明远
王穎%馮世慶%趙鵬%焦新旭%魏誌堅%韓明遠
왕영%풍세경%조붕%초신욱%위지견%한명원
脊髓损伤%脐带间允质干细胞%细胞移植%大鼠
脊髓損傷%臍帶間允質榦細胞%細胞移植%大鼠
척수손상%제대간윤질간세포%세포이식%대서
目的:观察大鼠脊髓损伤后不同时期局部移植人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchy-mal stem cells,hUCMSCs)修复脊髓损伤的效果,探讨hUCMSCs局部移植治疗脊髓损伤(spianl cord injury,SCI)的最佳移植时机.方法:雌性Wistar大鼠80只,随机均分为A、B、C、D组,以Impactor Model-Ⅱ打击器制备脊髓胸10(T10)损伤模型.A组为单纯损伤组,B组损伤后3d移植hUCMSCs,C组损伤后1w移植hUCM-SCs,D组损伤后3w移植hUCMSCs,分别于造模后24h、移植前1d及移植后8w(A组与D组损伤后相应时间点相同)每周对各组大鼠后肢功能进行行为学评分(BBB评分);移植后8周免疫组化染色观察移植细胞的存活、分化和血管再牛情况,10周时用生物素葡聚糖胺(biotin dextran amine,BDA)示踪皮质脊髓束(corticospinal tract,CST)观察轴突的再生情况.结果:SCI后24h各组大鼠BBB评分无显著性差异(P＞0.05),D组在移植前和移植后1周与A组相应时间点的BBB评分无显著性差异(P＞0.05),移植后2w起各时间点评分均明显高于A组相应时间点,差异有统计学意义(P<0.05);A组在SCI后9w时到达平台期,与实验结束时相比差异无统计学意义(P>0.05).移植各组移植后BBB评分逐渐上升,后一个时间点与同组前一时间点比较差异有显著性意义(P<0.05),移植后6w开始C组明显高于B、D组(P＜0.05).免疫组化染色A组脊髓中未见Brdu阳性细胞,损伤区血管形态欠完整,未见新生血管;损伤周围星形胶质细胞大量增生,细胞肥大、突起增多、排列不规则,形成胶质瘢痕;未见BDA标记的皮质脊髓束通过损伤区.B、C、D组脊髓中均有Brdu阳性标记的细胞存活,C、D组中细胞数量明显多于B组,但三组中均未见到移植细胞向神经元或神经胶质样细胞分化;B、D组损伤周围的星形胶质细胞较A组减少,但排列仍欠规则;C组损伤周围星形胶质细胞形态趋于正常,排列规则,且有大量星形胶质细胞通过损伤区,血管再生数目及通过损伤区的皮质脊髓束神经纤维也明显多于B、D组.结论:大鼠SCI后局部移植的hUCMSCs能长期存活,抑制胶质瘢痕形成,改善后肢运动功能;SCI后1w移植的效果优于SCI后3d和3w时移植的效果.
目的:觀察大鼠脊髓損傷後不同時期跼部移植人臍帶間充質榦細胞(human umbilical cord mesenchy-mal stem cells,hUCMSCs)脩複脊髓損傷的效果,探討hUCMSCs跼部移植治療脊髓損傷(spianl cord injury,SCI)的最佳移植時機.方法:雌性Wistar大鼠80隻,隨機均分為A、B、C、D組,以Impactor Model-Ⅱ打擊器製備脊髓胸10(T10)損傷模型.A組為單純損傷組,B組損傷後3d移植hUCMSCs,C組損傷後1w移植hUCM-SCs,D組損傷後3w移植hUCMSCs,分彆于造模後24h、移植前1d及移植後8w(A組與D組損傷後相應時間點相同)每週對各組大鼠後肢功能進行行為學評分(BBB評分);移植後8週免疫組化染色觀察移植細胞的存活、分化和血管再牛情況,10週時用生物素葡聚糖胺(biotin dextran amine,BDA)示蹤皮質脊髓束(corticospinal tract,CST)觀察軸突的再生情況.結果:SCI後24h各組大鼠BBB評分無顯著性差異(P＞0.05),D組在移植前和移植後1週與A組相應時間點的BBB評分無顯著性差異(P＞0.05),移植後2w起各時間點評分均明顯高于A組相應時間點,差異有統計學意義(P<0.05);A組在SCI後9w時到達平檯期,與實驗結束時相比差異無統計學意義(P>0.05).移植各組移植後BBB評分逐漸上升,後一箇時間點與同組前一時間點比較差異有顯著性意義(P<0.05),移植後6w開始C組明顯高于B、D組(P＜0.05).免疫組化染色A組脊髓中未見Brdu暘性細胞,損傷區血管形態欠完整,未見新生血管;損傷週圍星形膠質細胞大量增生,細胞肥大、突起增多、排列不規則,形成膠質瘢痕;未見BDA標記的皮質脊髓束通過損傷區.B、C、D組脊髓中均有Brdu暘性標記的細胞存活,C、D組中細胞數量明顯多于B組,但三組中均未見到移植細胞嚮神經元或神經膠質樣細胞分化;B、D組損傷週圍的星形膠質細胞較A組減少,但排列仍欠規則;C組損傷週圍星形膠質細胞形態趨于正常,排列規則,且有大量星形膠質細胞通過損傷區,血管再生數目及通過損傷區的皮質脊髓束神經纖維也明顯多于B、D組.結論:大鼠SCI後跼部移植的hUCMSCs能長期存活,抑製膠質瘢痕形成,改善後肢運動功能;SCI後1w移植的效果優于SCI後3d和3w時移植的效果.
목적:관찰대서척수손상후불동시기국부이식인제대간충질간세포(human umbilical cord mesenchy-mal stem cells,hUCMSCs)수복척수손상적효과,탐토hUCMSCs국부이식치료척수손상(spianl cord injury,SCI)적최가이식시궤.방법:자성Wistar대서80지,수궤균분위A、B、C、D조,이Impactor Model-Ⅱ타격기제비척수흉10(T10)손상모형.A조위단순손상조,B조손상후3d이식hUCMSCs,C조손상후1w이식hUCM-SCs,D조손상후3w이식hUCMSCs,분별우조모후24h、이식전1d급이식후8w(A조여D조손상후상응시간점상동)매주대각조대서후지공능진행행위학평분(BBB평분);이식후8주면역조화염색관찰이식세포적존활、분화화혈관재우정황,10주시용생물소포취당알(biotin dextran amine,BDA)시종피질척수속(corticospinal tract,CST)관찰축돌적재생정황.결과:SCI후24h각조대서BBB평분무현저성차이(P＞0.05),D조재이식전화이식후1주여A조상응시간점적BBB평분무현저성차이(P＞0.05),이식후2w기각시간점평분균명현고우A조상응시간점,차이유통계학의의(P<0.05);A조재SCI후9w시도체평태기,여실험결속시상비차이무통계학의의(P>0.05).이식각조이식후BBB평분축점상승,후일개시간점여동조전일시간점비교차이유현저성의의(P<0.05),이식후6w개시C조명현고우B、D조(P＜0.05).면역조화염색A조척수중미견Brdu양성세포,손상구혈관형태흠완정,미견신생혈관;손상주위성형효질세포대량증생,세포비대、돌기증다、배렬불규칙,형성효질반흔;미견BDA표기적피질척수속통과손상구.B、C、D조척수중균유Brdu양성표기적세포존활,C、D조중세포수량명현다우B조,단삼조중균미견도이식세포향신경원혹신경효질양세포분화;B、D조손상주위적성형효질세포교A조감소,단배렬잉흠규칙;C조손상주위성형효질세포형태추우정상,배렬규칙,차유대량성형효질세포통과손상구,혈관재생수목급통과손상구적피질척수속신경섬유야명현다우B、D조.결론:대서SCI후국부이식적hUCMSCs능장기존활,억제효질반흔형성,개선후지운동공능;SCI후1w이식적효과우우SCI후3d화3w시이식적효과.
