中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
10期
1825-1829
,共5页
许林锋%倪嘉延%陈耀庭%孙宏亮%吴裕丹
許林鋒%倪嘉延%陳耀庭%孫宏亮%吳裕丹
허림봉%예가연%진요정%손굉량%오유단
缺氧诱导因子%1α%RNA干扰%p27蛋白%Ki67蛋白%CBRH-7919细胞
缺氧誘導因子%1α%RNA榦擾%p27蛋白%Ki67蛋白%CBRH-7919細胞
결양유도인자%1α%RNA간우%p27단백%Ki67단백%CBRH-7919세포
目的:探讨沉默缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)基因对大鼠肝癌CBRH-7919细胞在缺氧状态下p27和Ki67表达的影响.方法:选用大鼠肝癌细胞株CBRH-7919作为研究对象,利用氯化钻(CoCl2)模拟缺氧状态.构建HIF-1α siRNA特异性载体,利用小分子RNA干扰技术沉默肝癌细胞HIF-1α基因.应用real-time RT-PCR和Western blotting方法分别检测肝癌细胞HIF-1α mRNA和蛋白的表达变化,用Western blotting方法检测肝癌细胞 p27和Ki67 蛋白的表达变化.应用流式细胞术检测细胞周期的变化.结果:在缺氧条件下,肝癌细胞HIF-1α mRNA及蛋白表达显著增多(P<0.05).HIF-1α基因被沉默后,HIF-1α mRNA和蛋白表达以及Ki67蛋白表达量明显减少(P<0.05),p27蛋白表达量显著增多(P<0.05).转染组G0/G1期的肝癌细胞数量明显多于对照组,S期细胞显著减少(P<0.05).结论:缺氧可以诱导肝癌细胞HIF-1α的表达;特异性siRNA沉默HIF-1α,可能通过促进p27的表达和抑制Ki67的表达,在一定程度上抑制了肝癌细胞的增殖.
目的:探討沉默缺氧誘導因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)基因對大鼠肝癌CBRH-7919細胞在缺氧狀態下p27和Ki67錶達的影響.方法:選用大鼠肝癌細胞株CBRH-7919作為研究對象,利用氯化鑽(CoCl2)模擬缺氧狀態.構建HIF-1α siRNA特異性載體,利用小分子RNA榦擾技術沉默肝癌細胞HIF-1α基因.應用real-time RT-PCR和Western blotting方法分彆檢測肝癌細胞HIF-1α mRNA和蛋白的錶達變化,用Western blotting方法檢測肝癌細胞 p27和Ki67 蛋白的錶達變化.應用流式細胞術檢測細胞週期的變化.結果:在缺氧條件下,肝癌細胞HIF-1α mRNA及蛋白錶達顯著增多(P<0.05).HIF-1α基因被沉默後,HIF-1α mRNA和蛋白錶達以及Ki67蛋白錶達量明顯減少(P<0.05),p27蛋白錶達量顯著增多(P<0.05).轉染組G0/G1期的肝癌細胞數量明顯多于對照組,S期細胞顯著減少(P<0.05).結論:缺氧可以誘導肝癌細胞HIF-1α的錶達;特異性siRNA沉默HIF-1α,可能通過促進p27的錶達和抑製Ki67的錶達,在一定程度上抑製瞭肝癌細胞的增殖.
목적:탐토침묵결양유도인자1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)기인대대서간암CBRH-7919세포재결양상태하p27화Ki67표체적영향.방법:선용대서간암세포주CBRH-7919작위연구대상,이용록화찬(CoCl2)모의결양상태.구건HIF-1α siRNA특이성재체,이용소분자RNA간우기술침묵간암세포HIF-1α기인.응용real-time RT-PCR화Western blotting방법분별검측간암세포HIF-1α mRNA화단백적표체변화,용Western blotting방법검측간암세포 p27화Ki67 단백적표체변화.응용류식세포술검측세포주기적변화.결과:재결양조건하,간암세포HIF-1α mRNA급단백표체현저증다(P<0.05).HIF-1α기인피침묵후,HIF-1α mRNA화단백표체이급Ki67단백표체량명현감소(P<0.05),p27단백표체량현저증다(P<0.05).전염조G0/G1기적간암세포수량명현다우대조조,S기세포현저감소(P<0.05).결론:결양가이유도간암세포HIF-1α적표체;특이성siRNA침묵HIF-1α,가능통과촉진p27적표체화억제Ki67적표체,재일정정도상억제료간암세포적증식.
