中华传染病杂志
中華傳染病雜誌
중화전염병잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
2004年
2期
86-89
,共4页
张申英%张欣欣%金根娣%仇德琪%陆志檬
張申英%張訢訢%金根娣%仇德琪%陸誌檬
장신영%장흔흔%금근제%구덕기%륙지몽
C型肝炎样病毒属%免疫球蛋白可变区%重组融合蛋白质类
C型肝炎樣病毒屬%免疫毬蛋白可變區%重組融閤蛋白質類
C형간염양병독속%면역구단백가변구%중조융합단백질류
目的克隆并表达中国不同地区不同基因型的丙型肝炎病毒高变区1(HCV HVR1)蛋白,并用表达纯化产物检测慢性丙型肝炎患者血清中的相应抗体,分析其临床意义.方法根据31株HCV HVR1序列分析及免疫原性预测结果,选择4株克隆(1b型3株,2a型1株),从pGEMT-E2克隆中扩增得到4个HVR1片段,将其分别克隆到原核表达载体pQE40中,表达产物经纯化后用以检测慢性丙型肝炎患者血清中的HVR1抗体.结果构建的HVR1原核表达载体在大肠埃希菌中成功表达了4种相对分子质量约为28 000的二氢叶酸还原酶(DHFR)-HVR1融合蛋白,纯化蛋白的获得率约为320～800 μg/100ml培养液.这4种融合蛋白(SH1b、BJ1b、SD1b、SD2a)与慢性丙型肝炎患者的血清结合率分别为72.8%(51/70)、60%(42/70)、48.6%(34/70)和58.6%(41/70).在20例用干扰素治疗的丙型肝炎患者中,57%(4/7)的干扰素治疗无应答者治疗前血清能与之反应,而应答者血清中只有15.3%(2/13)能与之反应.干扰素治疗应答者血清与4种融合蛋白反应的A值高于治疗无应答者(P＜0.05).结论选择的4株HCV HVR1片段在大肠埃希菌中获得成功表达,所得4种HVR1融合蛋白能与HCV感染者血清发生较广泛的反应.
目的剋隆併錶達中國不同地區不同基因型的丙型肝炎病毒高變區1(HCV HVR1)蛋白,併用錶達純化產物檢測慢性丙型肝炎患者血清中的相應抗體,分析其臨床意義.方法根據31株HCV HVR1序列分析及免疫原性預測結果,選擇4株剋隆(1b型3株,2a型1株),從pGEMT-E2剋隆中擴增得到4箇HVR1片段,將其分彆剋隆到原覈錶達載體pQE40中,錶達產物經純化後用以檢測慢性丙型肝炎患者血清中的HVR1抗體.結果構建的HVR1原覈錶達載體在大腸埃希菌中成功錶達瞭4種相對分子質量約為28 000的二氫葉痠還原酶(DHFR)-HVR1融閤蛋白,純化蛋白的穫得率約為320～800 μg/100ml培養液.這4種融閤蛋白(SH1b、BJ1b、SD1b、SD2a)與慢性丙型肝炎患者的血清結閤率分彆為72.8%(51/70)、60%(42/70)、48.6%(34/70)和58.6%(41/70).在20例用榦擾素治療的丙型肝炎患者中,57%(4/7)的榦擾素治療無應答者治療前血清能與之反應,而應答者血清中隻有15.3%(2/13)能與之反應.榦擾素治療應答者血清與4種融閤蛋白反應的A值高于治療無應答者(P＜0.05).結論選擇的4株HCV HVR1片段在大腸埃希菌中穫得成功錶達,所得4種HVR1融閤蛋白能與HCV感染者血清髮生較廣汎的反應.
목적극륭병표체중국불동지구불동기인형적병형간염병독고변구1(HCV HVR1)단백,병용표체순화산물검측만성병형간염환자혈청중적상응항체,분석기림상의의.방법근거31주HCV HVR1서렬분석급면역원성예측결과,선택4주극륭(1b형3주,2a형1주),종pGEMT-E2극륭중확증득도4개HVR1편단,장기분별극륭도원핵표체재체pQE40중,표체산물경순화후용이검측만성병형간염환자혈청중적HVR1항체.결과구건적HVR1원핵표체재체재대장애희균중성공표체료4충상대분자질량약위28 000적이경협산환원매(DHFR)-HVR1융합단백,순화단백적획득솔약위320～800 μg/100ml배양액.저4충융합단백(SH1b、BJ1b、SD1b、SD2a)여만성병형간염환자적혈청결합솔분별위72.8%(51/70)、60%(42/70)、48.6%(34/70)화58.6%(41/70).재20례용간우소치료적병형간염환자중,57%(4/7)적간우소치료무응답자치료전혈청능여지반응,이응답자혈청중지유15.3%(2/13)능여지반응.간우소치료응답자혈청여4충융합단백반응적A치고우치료무응답자(P＜0.05).결론선택적4주HCV HVR1편단재대장애희균중획득성공표체,소득4충HVR1융합단백능여HCV감염자혈청발생교엄범적반응.
