中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2004年
3期
54-58
,共5页
赵革新%任鲁风%刘凤杰%何新舟%董小岩%吴小兵%侯云德
趙革新%任魯風%劉鳳傑%何新舟%董小巖%吳小兵%侯雲德
조혁신%임로풍%류봉걸%하신주%동소암%오소병%후운덕
SARS冠状病毒%全基因组扩增%基因芯片
SARS冠狀病毒%全基因組擴增%基因芯片
SARS관상병독%전기인조확증%기인심편
针对SARS冠状病毒的分子生物学检测是控制SARS流行的关键环节.为评价全基因组扩增对SARS微量样本检测的影响,采用6-mer随机引物反转录,用加接头的随机引物合成第二链,再以接头序列为引物扩增并掺入荧光标记,最后与带有70-mer探针的基因芯片杂交.此非特异方法基本覆盖了样本中的全部DNA,结果发现SARS冠状病毒全基因组的扩增效果对基因芯片杂交结果的均匀性有较大影响,PCR循环次数增多会导致扩增均匀性的降低.分析了不同的引物对全基因组扩增均匀性的影响,探讨了全基因组扩增策略的缺陷.
針對SARS冠狀病毒的分子生物學檢測是控製SARS流行的關鍵環節.為評價全基因組擴增對SARS微量樣本檢測的影響,採用6-mer隨機引物反轉錄,用加接頭的隨機引物閤成第二鏈,再以接頭序列為引物擴增併摻入熒光標記,最後與帶有70-mer探針的基因芯片雜交.此非特異方法基本覆蓋瞭樣本中的全部DNA,結果髮現SARS冠狀病毒全基因組的擴增效果對基因芯片雜交結果的均勻性有較大影響,PCR循環次數增多會導緻擴增均勻性的降低.分析瞭不同的引物對全基因組擴增均勻性的影響,探討瞭全基因組擴增策略的缺陷.
침대SARS관상병독적분자생물학검측시공제SARS류행적관건배절.위평개전기인조확증대SARS미량양본검측적영향,채용6-mer수궤인물반전록,용가접두적수궤인물합성제이련,재이접두서렬위인물확증병참입형광표기,최후여대유70-mer탐침적기인심편잡교.차비특이방법기본복개료양본중적전부DNA,결과발현SARS관상병독전기인조적확증효과대기인심편잡교결과적균균성유교대영향,PCR순배차수증다회도치확증균균성적강저.분석료불동적인물대전기인조확증균균성적영향,탐토료전기인조확증책략적결함.
