CAJ | 학술논문

目的以血清芳香酯酶(ArE)为模型,用模拟和实验考察积分法测定酶活性的可靠性.方法用酚乙酸酯测定ArE反应曲线.按ArE的积分速度方程In(S0/Si)+(S0-Si)/Km=(Vm/Km)×ti计算无误差反应曲线,叠加随机误差得模拟曲线.以底物浓度(S0)为参数用Equ①非线性拟合测定Vm/Km,换算得Vm.结果模拟表明积分法测定酶活性与S0无关,升高S0可提高测定上限.实验表明S0低于Km的20%时Vm/Km无变化;重复性5.8%(ν= 6);本底和反应起点延迟无干扰;升高S0可提高上限.此积分法用20% Km的S0测定86份血清,ArE活性Vm呈正态分布,与据初速度按米氏方程计算的Vm无差异.结论此积分法能可靠测定酶活性Vm/Km或Vm.
목적이혈청방향지매(ArE)위모형,용모의화실험고찰적분법측정매활성적가고성.방법용분을산지측정ArE반응곡선.안ArE적적분속도방정In(S0/Si)+(S0-Si)/Km=(Vm/Km)×ti계산무오차반응곡선,첩가수궤오차득모의곡선.이저물농도(S0)위삼수용Equ①비선성의합측정Vm/Km,환산득Vm.결과모의표명적분법측정매활성여S0무관,승고S0가제고측정상한.실험표명S0저우Km적20%시Vm/Km무변화;중복성5.8%(ν= 6);본저화반응기점연지무간우;승고S0가제고상한.차적분법용20% Km적S0측정86빈혈청,ArE활성Vm정정태분포,여거초속도안미씨방정계산적Vm무차이.결론차적분법능가고측정매활성Vm/Km혹Vm.