CAJ | 학술논문

目的观察乙醇对小鼠胰岛瘤细胞(NIT-1细胞)凋亡的影响及Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的变化,探讨乙醇诱发小鼠胰岛瘤细胞凋亡的分子机制.方法体外培养的小鼠NIT-1细胞,不同剂量乙醇(0、50、100、200、400mmol/L)作用24h,单细胞凝胶电泳实验(SCGE),AnnexinV/PI双标记法流式细胞仪检测细胞凋亡情况.不同剂量的乙醇作用6、12、24 h,RT-PCR法检测与凋亡有关的基因Bcl-2,Bax和Caspase-3 mRNA表达水平.结果SCGE实验结果显示,低剂量乙醇损伤不明显,高剂量(200、400 mmol/L)组DNA迁移率、DNA损伤程度分级、DNA平均迁移长度与对照组比较,差异均有显著性.Annexin V/PI检测结果表明,200、400mmol/L乙醇组NIT-1细胞凋亡率升高,与对照组相比,差异有非常显著性.乙醇作用6 h,随着乙醇剂量增加,Bcl-2/Bax mRNA表达先升高后降低;乙醇作用12 h,400 mmol/L剂量Bcl-2/Bax比值下降;作用24 h,各剂量组Bcl-2/Bax比值均下降.Caspase-3 mRNA表达水平与乙醇剂量和作用时间相关.400 mmol/L剂量组作用24 h,Caspase-3 mRNA表达增加.结论乙醇可诱发体外培养的NIT-1细胞凋亡,凋亡的发生很可能与Bcl-2家族和Caspase-3激活有关.
목적관찰을순대소서이도류세포(NIT-1세포)조망적영향급Bcl-2、Bax화Caspase-3표체적변화,탐토을순유발소서이도류세포조망적분자궤제.방법체외배양적소서NIT-1세포,불동제량을순(0、50、100、200、400mmol/L)작용24h,단세포응효전영실험(SCGE),AnnexinV/PI쌍표기법류식세포의검측세포조망정황.불동제량적을순작용6、12、24 h,RT-PCR법검측여조망유관적기인Bcl-2,Bax화Caspase-3 mRNA표체수평.결과SCGE실험결과현시,저제량을순손상불명현,고제량(200、400 mmol/L)조DNA천이솔、DNA손상정도분급、DNA평균천이장도여대조조비교,차이균유현저성.Annexin V/PI검측결과표명,200、400mmol/L을순조NIT-1세포조망솔승고,여대조조상비,차이유비상현저성.을순작용6 h,수착을순제량증가,Bcl-2/Bax mRNA표체선승고후강저;을순작용12 h,400 mmol/L제량Bcl-2/Bax비치하강;작용24 h,각제량조Bcl-2/Bax비치균하강.Caspase-3 mRNA표체수평여을순제량화작용시간상관.400 mmol/L제량조작용24 h,Caspase-3 mRNA표체증가.결론을순가유발체외배양적NIT-1세포조망,조망적발생흔가능여Bcl-2가족화Caspase-3격활유관.