上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2009年
4期
416-420
,共5页
LIANG Meng-fan%梁梦凡%王学敏%袁媛%薛瑛%江伟
LIANG Meng-fan%樑夢凡%王學敏%袁媛%薛瑛%江偉
LIANG Meng-fan%량몽범%왕학민%원원%설영%강위
谷氨酰胺%热休克蛋白72%肿瘤坏死因子-α%巨噬细胞
穀氨酰胺%熱休剋蛋白72%腫瘤壞死因子-α%巨噬細胞
곡안선알%열휴극단백72%종류배사인자-α%거서세포
目的 探讨不同条件下谷氨酰胺(Gln)对小鼠腹腔巨噬细胞株RAW264.7热休克蛋白(HSP)72表达和肿瘤坏死因子(TNF)-α释放的影响. 方法 将RAW264.7细胞与含Gln(0、0.5和8 mmol/L)的培养液分别进行下列处理:①共同培养165 min后,加入脂多糖 (LPS)刺激0、1、4、12和24 h;②共同培养的同时行热应激预处理45 min,37℃培养2h后加入LPS刺激4 h;③共同培养的同时行DON预处理,165 min后加入LPS刺激4 h;④两者与含LPS的培养液共同培养1 h,改用含0.5 mmol/L Gln和LPS的培养液继续培养4 h.ELISA法检测细胞上清液TNF-α的浓度,Western blotting检测细胞HSP 72蛋白表达.结果 ①LPS刺激后4 h,RAW264.7细胞均有HSP 72表达,经8 mmol/L Gln培养者较经0和0.5 mmol/L Gln培养者HSP 72表达显著增加(P<0.01),而24 h时三者HSP 72表达差异无统计学意义(P>0.05);Gln促进TNF-α释放,与Gln呈时间和浓度依赖关系.②热应激显著促进Gln 诱导的HSP 72表达(P<0.01),抑制Gln 诱导的TNF-α释放,但TNF-α释放仍随Gln浓度增加而增加.③DON预处理不影响HSP 72的表达,但显著抑制TNF-α释放(P<0.01).④短时间不同浓度Gln处理,与0.5和8 mmol/L Gln共同培养者较与0 mmol/L Gln 共同培养者HSP 72表达显著增加(P<0.01);TNF-α的释放随Gln浓度增加有升高趋势,但三者间差异无统计学意义(P>0.05).结论 Gln可诱导RAW264.7细胞表达HSP 72,但并不足以抑制其TNF-α释放.除诱导HSP 72表达外,Gln在脓毒症时调节机体炎症反应还可能存在其他机制.
目的 探討不同條件下穀氨酰胺(Gln)對小鼠腹腔巨噬細胞株RAW264.7熱休剋蛋白(HSP)72錶達和腫瘤壞死因子(TNF)-α釋放的影響. 方法 將RAW264.7細胞與含Gln(0、0.5和8 mmol/L)的培養液分彆進行下列處理:①共同培養165 min後,加入脂多糖 (LPS)刺激0、1、4、12和24 h;②共同培養的同時行熱應激預處理45 min,37℃培養2h後加入LPS刺激4 h;③共同培養的同時行DON預處理,165 min後加入LPS刺激4 h;④兩者與含LPS的培養液共同培養1 h,改用含0.5 mmol/L Gln和LPS的培養液繼續培養4 h.ELISA法檢測細胞上清液TNF-α的濃度,Western blotting檢測細胞HSP 72蛋白錶達.結果 ①LPS刺激後4 h,RAW264.7細胞均有HSP 72錶達,經8 mmol/L Gln培養者較經0和0.5 mmol/L Gln培養者HSP 72錶達顯著增加(P<0.01),而24 h時三者HSP 72錶達差異無統計學意義(P>0.05);Gln促進TNF-α釋放,與Gln呈時間和濃度依賴關繫.②熱應激顯著促進Gln 誘導的HSP 72錶達(P<0.01),抑製Gln 誘導的TNF-α釋放,但TNF-α釋放仍隨Gln濃度增加而增加.③DON預處理不影響HSP 72的錶達,但顯著抑製TNF-α釋放(P<0.01).④短時間不同濃度Gln處理,與0.5和8 mmol/L Gln共同培養者較與0 mmol/L Gln 共同培養者HSP 72錶達顯著增加(P<0.01);TNF-α的釋放隨Gln濃度增加有升高趨勢,但三者間差異無統計學意義(P>0.05).結論 Gln可誘導RAW264.7細胞錶達HSP 72,但併不足以抑製其TNF-α釋放.除誘導HSP 72錶達外,Gln在膿毒癥時調節機體炎癥反應還可能存在其他機製.
목적 탐토불동조건하곡안선알(Gln)대소서복강거서세포주RAW264.7열휴극단백(HSP)72표체화종류배사인자(TNF)-α석방적영향. 방법 장RAW264.7세포여함Gln(0、0.5화8 mmol/L)적배양액분별진행하렬처리:①공동배양165 min후,가입지다당 (LPS)자격0、1、4、12화24 h;②공동배양적동시행열응격예처리45 min,37℃배양2h후가입LPS자격4 h;③공동배양적동시행DON예처리,165 min후가입LPS자격4 h;④량자여함LPS적배양액공동배양1 h,개용함0.5 mmol/L Gln화LPS적배양액계속배양4 h.ELISA법검측세포상청액TNF-α적농도,Western blotting검측세포HSP 72단백표체.결과 ①LPS자격후4 h,RAW264.7세포균유HSP 72표체,경8 mmol/L Gln배양자교경0화0.5 mmol/L Gln배양자HSP 72표체현저증가(P<0.01),이24 h시삼자HSP 72표체차이무통계학의의(P>0.05);Gln촉진TNF-α석방,여Gln정시간화농도의뢰관계.②열응격현저촉진Gln 유도적HSP 72표체(P<0.01),억제Gln 유도적TNF-α석방,단TNF-α석방잉수Gln농도증가이증가.③DON예처리불영향HSP 72적표체,단현저억제TNF-α석방(P<0.01).④단시간불동농도Gln처리,여0.5화8 mmol/L Gln공동배양자교여0 mmol/L Gln 공동배양자HSP 72표체현저증가(P<0.01);TNF-α적석방수Gln농도증가유승고추세,단삼자간차이무통계학의의(P>0.05).결론 Gln가유도RAW264.7세포표체HSP 72,단병불족이억제기TNF-α석방.제유도HSP 72표체외,Gln재농독증시조절궤체염증반응환가능존재기타궤제.
