华南国防医学杂志
華南國防醫學雜誌
화남국방의학잡지
MILLITARY MEDICAL JOURNAL OF SOUTH CHINA
2010年
6期
431-434
,共4页
饶桂荣%朱梅%杨妙青%杨富强%王洪敏%吴庆洲%陈光明
饒桂榮%硃梅%楊妙青%楊富彊%王洪敏%吳慶洲%陳光明
요계영%주매%양묘청%양부강%왕홍민%오경주%진광명
人白细胞介素21%构建%转染%基因表达
人白細胞介素21%構建%轉染%基因錶達
인백세포개소21%구건%전염%기인표체
目的 构建人的真核表达载体pVAX/IL-21,并进行体外细胞转染实验的鉴定研究. 方法 采用PCR扩增技术扩增含有白细胞介素21(interleukin 21,IL-21)的基因,亚克隆于真核表达载体pVAX1,并进行酶切和测序分析;将所构建的质粒转染COS-7细胞检测其表达情况. 结果 酶谱和测序分析表明,构建的质粒pVAX/IL-21(pIL-21)基因片段的方向、序列完全正确;ELISA法定量检测双质粒转染COS-7细胞后24h、48h、72h、96h均检测到目的 基因的蛋白表达,其中转染48h的表达水平较高,达到45ng/ml. 结论 成功构建了人IL-21的整合表达质粒pIL-21,并具有较强的体外细胞转染活性,为进一步研究IL-21的生物学功能如抗肿瘤活性等提供了实验基础.
目的 構建人的真覈錶達載體pVAX/IL-21,併進行體外細胞轉染實驗的鑒定研究. 方法 採用PCR擴增技術擴增含有白細胞介素21(interleukin 21,IL-21)的基因,亞剋隆于真覈錶達載體pVAX1,併進行酶切和測序分析;將所構建的質粒轉染COS-7細胞檢測其錶達情況. 結果 酶譜和測序分析錶明,構建的質粒pVAX/IL-21(pIL-21)基因片段的方嚮、序列完全正確;ELISA法定量檢測雙質粒轉染COS-7細胞後24h、48h、72h、96h均檢測到目的 基因的蛋白錶達,其中轉染48h的錶達水平較高,達到45ng/ml. 結論 成功構建瞭人IL-21的整閤錶達質粒pIL-21,併具有較彊的體外細胞轉染活性,為進一步研究IL-21的生物學功能如抗腫瘤活性等提供瞭實驗基礎.
목적 구건인적진핵표체재체pVAX/IL-21,병진행체외세포전염실험적감정연구. 방법 채용PCR확증기술확증함유백세포개소21(interleukin 21,IL-21)적기인,아극륭우진핵표체재체pVAX1,병진행매절화측서분석;장소구건적질립전염COS-7세포검측기표체정황. 결과 매보화측서분석표명,구건적질립pVAX/IL-21(pIL-21)기인편단적방향、서렬완전정학;ELISA법정량검측쌍질립전염COS-7세포후24h、48h、72h、96h균검측도목적 기인적단백표체,기중전염48h적표체수평교고,체도45ng/ml. 결론 성공구건료인IL-21적정합표체질립pIL-21,병구유교강적체외세포전염활성,위진일보연구IL-21적생물학공능여항종류활성등제공료실험기출.
