湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
2011年
4期
854-857
,共4页
崔卫涛%胡思顺%王延昭%周晓芬%李自力%肖运才%毕丁仁
崔衛濤%鬍思順%王延昭%週曉芬%李自力%肖運纔%畢丁仁
최위도%호사순%왕연소%주효분%리자력%초운재%필정인
禽巴氏杆菌%原核表达%免疲原性
禽巴氏桿菌%原覈錶達%免疲原性
금파씨간균%원핵표체%면피원성
根据禽多杀性巴氏杆菌ATCC12 948株脂蛋白E基因(plpE)序列设计-对特异性引物,经PCR从禽多杀性巴氏杆菌C48-1株中扩增获得了全长plpE基因,大小约1kb.将plpE基因片段插入原核表达载体pET-28a中,构建了重组表达质粒pET-plpE.转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达获得了重组蛋白plpE.SDS-PAGE结果显示,重组蛋白plpE约为37.8kD,与预期大小相符.Western blot检测结果表明,重组蛋白plpE能与C48-1菌体阳性血清发生特异性反应,用重组蛋白plpE免疫小鼠,二免后2周用IOLD50C48-1菌株攻毒即获得了100%的保护,表明该蛋白具有良好的免疲原性,为进一步的交叉保护性试验研究和禽霍乱亚单位疫苗研制奠定了基础.
根據禽多殺性巴氏桿菌ATCC12 948株脂蛋白E基因(plpE)序列設計-對特異性引物,經PCR從禽多殺性巴氏桿菌C48-1株中擴增穫得瞭全長plpE基因,大小約1kb.將plpE基因片段插入原覈錶達載體pET-28a中,構建瞭重組錶達質粒pET-plpE.轉化大腸桿菌BL21(DE3),在IPTG誘導下錶達穫得瞭重組蛋白plpE.SDS-PAGE結果顯示,重組蛋白plpE約為37.8kD,與預期大小相符.Western blot檢測結果錶明,重組蛋白plpE能與C48-1菌體暘性血清髮生特異性反應,用重組蛋白plpE免疫小鼠,二免後2週用IOLD50C48-1菌株攻毒即穫得瞭100%的保護,錶明該蛋白具有良好的免疲原性,為進一步的交扠保護性試驗研究和禽霍亂亞單位疫苗研製奠定瞭基礎.
근거금다살성파씨간균ATCC12 948주지단백E기인(plpE)서렬설계-대특이성인물,경PCR종금다살성파씨간균C48-1주중확증획득료전장plpE기인,대소약1kb.장plpE기인편단삽입원핵표체재체pET-28a중,구건료중조표체질립pET-plpE.전화대장간균BL21(DE3),재IPTG유도하표체획득료중조단백plpE.SDS-PAGE결과현시,중조단백plpE약위37.8kD,여예기대소상부.Western blot검측결과표명,중조단백plpE능여C48-1균체양성혈청발생특이성반응,용중조단백plpE면역소서,이면후2주용IOLD50C48-1균주공독즉획득료100%적보호,표명해단백구유량호적면피원성,위진일보적교차보호성시험연구화금곽란아단위역묘연제전정료기출.
