中华耳科学杂志
中華耳科學雜誌
중화이과학잡지
CHINESE JOURNAL OF OTOLOGY
2011年
1期
87-91
,共5页
依达拉奉%化学性缺氧%内质网应激%氧化应激%凋亡%HEI-OC1听细胞
依達拉奉%化學性缺氧%內質網應激%氧化應激%凋亡%HEI-OC1聽細胞
의체랍봉%화학성결양%내질망응격%양화응격%조망%HEI-OC1은세포
目的 探讨依达拉奉(edaravone,EDA)能否保护HEI-OC1(House Ear Institute-organ of Corti 1)听细胞对抗氯化钴(CoCl2)诱导的内质网应激性凋亡.方法 用CoCl2处理HEl-OC1听细胞,建立化学性缺氧损伤HEI-OC1听细胞的体外模型.EDA在CoCl2处理细胞前1 h加入培养基中作为预处理.细胞计数试剂盒-8(cell count kit 8,CCK-8)比色法检测细胞存活率;试剂盒法检测细胞内丙二醛(Malondialdehvde,MDA)的含量;Western blot法(蛋白印迹法)检测葡萄糖调节蛋白78(glucose regulating protein 78,GRP78;或称内质网应激蛋白)及裂解型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(cleaved caspase-12,活化形式)的表达.结果 CoCl2在100～400 μmol/L浓度范围内处理HEI-OC1听细胞24h,可浓度依赖性地降低细胞活力;300μmol/L CoCl2处理HEI-OC1听细胞,可以上调内质网应激蛋白GRP78的表达、增加细胞内MDA的含量及活化caspase-12.在300μmoL/L CoCl2作用HEI-OC1听细胞前,用10～40μmol/L EDA预处理1 h可以浓度依赖性地抑制CoCl2诱导的毒性损伤作用,40μmol/L EDA预处理1 h可抑制CoCl2对GRP78表达的上调和对caspase-12的活化作用,以及CoCl2引起的MDA含量增加.结论 EDA可通过抗氧化及抗内质网应激引起的凋亡以保护HEI-OC1听细胞对抗CoCl2诱导的细胞损伤.
目的 探討依達拉奉(edaravone,EDA)能否保護HEI-OC1(House Ear Institute-organ of Corti 1)聽細胞對抗氯化鈷(CoCl2)誘導的內質網應激性凋亡.方法 用CoCl2處理HEl-OC1聽細胞,建立化學性缺氧損傷HEI-OC1聽細胞的體外模型.EDA在CoCl2處理細胞前1 h加入培養基中作為預處理.細胞計數試劑盒-8(cell count kit 8,CCK-8)比色法檢測細胞存活率;試劑盒法檢測細胞內丙二醛(Malondialdehvde,MDA)的含量;Western blot法(蛋白印跡法)檢測葡萄糖調節蛋白78(glucose regulating protein 78,GRP78;或稱內質網應激蛋白)及裂解型半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶-12(cleaved caspase-12,活化形式)的錶達.結果 CoCl2在100～400 μmol/L濃度範圍內處理HEI-OC1聽細胞24h,可濃度依賴性地降低細胞活力;300μmol/L CoCl2處理HEI-OC1聽細胞,可以上調內質網應激蛋白GRP78的錶達、增加細胞內MDA的含量及活化caspase-12.在300μmoL/L CoCl2作用HEI-OC1聽細胞前,用10～40μmol/L EDA預處理1 h可以濃度依賴性地抑製CoCl2誘導的毒性損傷作用,40μmol/L EDA預處理1 h可抑製CoCl2對GRP78錶達的上調和對caspase-12的活化作用,以及CoCl2引起的MDA含量增加.結論 EDA可通過抗氧化及抗內質網應激引起的凋亡以保護HEI-OC1聽細胞對抗CoCl2誘導的細胞損傷.
목적 탐토의체랍봉(edaravone,EDA)능부보호HEI-OC1(House Ear Institute-organ of Corti 1)은세포대항록화고(CoCl2)유도적내질망응격성조망.방법 용CoCl2처리HEl-OC1은세포,건립화학성결양손상HEI-OC1은세포적체외모형.EDA재CoCl2처리세포전1 h가입배양기중작위예처리.세포계수시제합-8(cell count kit 8,CCK-8)비색법검측세포존활솔;시제합법검측세포내병이철(Malondialdehvde,MDA)적함량;Western blot법(단백인적법)검측포도당조절단백78(glucose regulating protein 78,GRP78;혹칭내질망응격단백)급렬해형반광안산천동안산단백매-12(cleaved caspase-12,활화형식)적표체.결과 CoCl2재100～400 μmol/L농도범위내처리HEI-OC1은세포24h,가농도의뢰성지강저세포활력;300μmol/L CoCl2처리HEI-OC1은세포,가이상조내질망응격단백GRP78적표체、증가세포내MDA적함량급활화caspase-12.재300μmoL/L CoCl2작용HEI-OC1은세포전,용10～40μmol/L EDA예처리1 h가이농도의뢰성지억제CoCl2유도적독성손상작용,40μmol/L EDA예처리1 h가억제CoCl2대GRP78표체적상조화대caspase-12적활화작용,이급CoCl2인기적MDA함량증가.결론 EDA가통과항양화급항내질망응격인기적조망이보호HEI-OC1은세포대항CoCl2유도적세포손상.
