中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2011年
5期
594-599
,共6页
路晓薇%冯崇锦%郭俊兵%罗冬元
路曉薇%馮崇錦%郭俊兵%囉鼕元
로효미%풍숭금%곽준병%라동원
舌癌%DNA复制%Cdc6%RNA干扰%慢病毒载体
舌癌%DNA複製%Cdc6%RNA榦擾%慢病毒載體
설암%DNA복제%Cdc6%RNA간우%만병독재체
摘要:[目的]应用RNA干扰技术,靶向抑制舌癌细胞中Cdc6的表达,观察舌癌细胞增殖、凋亡等改变,初步探讨下调Cdc6表达抑制舌癌细胞增殖的分子机制.[方法]实验分4组:空白对照组CON,阴性对照组NC,实验组KD1和KD2.应用前期构建的Cdc6的慢病毒载体,转染舌癌CAL-27细胞,通过Real time RT-PCR和Western blot法检测Cdc6 mRNA及蛋白的表达；以MTT法测定活细胞数并绘制细胞生长曲线;利用流式细胞仪观察细胞凋亡.[结果]慢病毒载体转染CAL-27细胞后,Real time RT-PCR和Western blot实验结果显示:舌癌CAL-27细胞中Cdc6的表达明显被抑制,相对NC组,KD1、KD2组对Cdc6基因敲减效率分别为55.60％和64.38％.蛋白表达分别降低44.44％和66.67％；细胞生长曲线表明,细胞生长明显减缓,KD1和KD2组细胞生长抑制率分别为33.68％和35.79％；流式细胞仪检测细胞周期显示:KD1组、KD2组两组细胞凋亡率较NC组均有显著上升,分别为57.55％和83.81％.[结论]靶向Cdc6慢病毒载体RNA干扰能有效抑制舌癌CAL-27细胞的DNA复制,阻止舌癌细胞的增殖.
摘要:[目的]應用RNA榦擾技術,靶嚮抑製舌癌細胞中Cdc6的錶達,觀察舌癌細胞增殖、凋亡等改變,初步探討下調Cdc6錶達抑製舌癌細胞增殖的分子機製.[方法]實驗分4組:空白對照組CON,陰性對照組NC,實驗組KD1和KD2.應用前期構建的Cdc6的慢病毒載體,轉染舌癌CAL-27細胞,通過Real time RT-PCR和Western blot法檢測Cdc6 mRNA及蛋白的錶達；以MTT法測定活細胞數併繪製細胞生長麯線;利用流式細胞儀觀察細胞凋亡.[結果]慢病毒載體轉染CAL-27細胞後,Real time RT-PCR和Western blot實驗結果顯示:舌癌CAL-27細胞中Cdc6的錶達明顯被抑製,相對NC組,KD1、KD2組對Cdc6基因敲減效率分彆為55.60％和64.38％.蛋白錶達分彆降低44.44％和66.67％；細胞生長麯線錶明,細胞生長明顯減緩,KD1和KD2組細胞生長抑製率分彆為33.68％和35.79％；流式細胞儀檢測細胞週期顯示:KD1組、KD2組兩組細胞凋亡率較NC組均有顯著上升,分彆為57.55％和83.81％.[結論]靶嚮Cdc6慢病毒載體RNA榦擾能有效抑製舌癌CAL-27細胞的DNA複製,阻止舌癌細胞的增殖.
적요:[목적]응용RNA간우기술,파향억제설암세포중Cdc6적표체,관찰설암세포증식、조망등개변,초보탐토하조Cdc6표체억제설암세포증식적분자궤제.[방법]실험분4조:공백대조조CON,음성대조조NC,실험조KD1화KD2.응용전기구건적Cdc6적만병독재체,전염설암CAL-27세포,통과Real time RT-PCR화Western blot법검측Cdc6 mRNA급단백적표체；이MTT법측정활세포수병회제세포생장곡선;이용류식세포의관찰세포조망.[결과]만병독재체전염CAL-27세포후,Real time RT-PCR화Western blot실험결과현시:설암CAL-27세포중Cdc6적표체명현피억제,상대NC조,KD1、KD2조대Cdc6기인고감효솔분별위55.60％화64.38％.단백표체분별강저44.44％화66.67％；세포생장곡선표명,세포생장명현감완,KD1화KD2조세포생장억제솔분별위33.68％화35.79％；류식세포의검측세포주기현시:KD1조、KD2조량조세포조망솔교NC조균유현저상승,분별위57.55％화83.81％.[결론]파향Cdc6만병독재체RNA간우능유효억제설암CAL-27세포적DNA복제,조지설암세포적증식.
